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首頁 > 技術天地 > 吲哚菁綠(Indocyanine Green)

吲哚菁綠(Indocyanine Green)

吲哚菁綠 (ICG) 是一種帶負電荷的三碳菁染料,因其低毒性和紅外熒光發射而被廣泛利用。 ICG 的毒性很小,這是因為它與血漿蛋白的結合,將其限制在血管隔室中,在那里它被肝臟迅速代謝并僅由肝臟和膽管排出。 ICG 和 ICG 衍生物可用作體內分子成像探針。 它們的紅外熒光發射可穿透組織幾毫米,以促進深層組織和小動物體內成像。 ICG 用于醫學診斷以確定心輸出量、肝功能和肝血流量以及眼科血管造影術。 此外,ICG 已與多種抗體偶聯,用于癌細胞和腫瘤靶向。



光譜性質

激發光線:  785 nm
濾波器組: Cy7
最大激發光: 788nm
最大發射光: 813nm
消光系數: 230,000cm-1 M -1
量子產率: 0.04

圖1:吲哚菁綠-OSU(貨號182)的吸光度和發射最大值



iFluor 790 - ICG 和 Alexa Fluor® 790 的卓越替代品

iFluor 790 是最亮的近紅外染料,其光譜類似于吲哚菁綠 (ICG)、Alexa Fluor® 790 和 IRDye® 800 染料。 iFluor 790 染料具有出色的水溶性和耐鹽性、對 pH 不敏感的熒光和產生光穩定的信號,非常適合高密度標記應用、蛋白質印跡和免疫細胞化學 (ICC) 分析以及蛋白質陣列、顯微鏡檢查、體內成像和紅外光學探針的開發。 iFluor 790 的發射與常用的遠紅熒光團如 Cy5(貨號 151)、Cy7(貨號 161)或別藻藍蛋白(ReadiUse APC,貨號 2503)完全分離,便于多色分析。 iFluor 790 適用于小動物體內成像應用或其他需要 NIR 檢測的成像應用,例如使用 LI-COR® Odyssey® 紅外成像系統的雙色蛋白質印跡應用。

iFluor 790 提供不同的活性染料形式和 ReadiLink 標記試劑盒,可用于標記具有明亮紅外熒光的蛋白質、抗體、肽和核苷酸。 還提供與各種抗體、鏈霉親和素和擴增底物偶聯的 iFluor 790 染料,這些染料針對細胞標記和檢測進行了優化。圖2.將 HeLa細胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼筆環肽染色。


表1.iFluor 790 - ICG 和 Alexa Fluor® 790 的卓越替代品

熒光染料 Ex max Em max ε Φ CF260 nm CF280 nm
iFluor 790, SE 786 nm 811 nm 250,000 0.13 0.1 0.09
ICG-OSu 788 nm 813 nm 230,000 0.04 0.112 0.072
Alexa Fluor® 790, NHS Ester 784 nm 814 nm 260,000 暫無 0.09 0.08
IRDye® 800 CW NHS Ester 774 nm 789 nm 240,000 暫無 0.03 0.03


吲哚菁綠衍生物

吲哚菁綠熒光染料與紅外熒光成像相結合,明顯提高了檢測靈敏度。它的光譜在700 到 1000 nm 之間的紅外波長范圍內,由于該區域生物分子的吸收最小,光散射和自發熒光都大大減少。 因此產生的低背景干擾和高信噪比提高了檢測靈敏度。

我們提供多種磺化和非磺化以及 PEG 修飾的吲哚菁綠衍生物和活性染料,用于標記蛋白質、抗體、肽和其他具有紅外熒光的生物分子。 可用的吲哚菁綠反應形式包括:

  • OSu:用于標記伯胺和仲胺 (-NH2)。
  • 馬來酰亞胺:用于標記含有游離巰基 (-SH) 的生物分子。
  • 胺:用于標記含有羰基(例如醛或羧基)的生物分子。
  • 炔烴和疊氮化物:用于通過點擊化學標記生物分子。
  • 酰肼:用于通過席夫堿化學標記生物分子。

非磺化吲哚菁綠

非磺化吲哚菁綠的衍生物由于其極低的水溶性,非常適合在有機介質中的應用。 這些衍生物需要使用有機共溶劑,例如 5-20% DMF 或 DMSO,以進行有效的生物分子標記。 當用吲哚菁綠衍生物標記生物分子時,首先將染料溶解在有機溶劑中,然后加入到生物分子在適當的水性緩沖液中的溶液中。


磺化吲哚菁綠

磺化吲哚菁綠衍生物含有磺基以促進染料在水溶液中的溶解。 添加帶電荷的磺酸鹽基團可減少游離染料分子和重標記偶聯物的聚集。 磺化吲哚菁綠染料高度水溶性,標記時不需要使用有機助溶劑。


PEG 修飾的吲哚菁綠

PEG 修飾(或 PEG 化)吲哚菁綠衍生物包含由聚(乙二醇)或 PEG 組成的間隔臂。 該間隔臂通過使具有不帶電荷的反應基團的吲哚菁綠衍生物可溶或具有帶電反應基團的那些更易溶來增加溶解度。 此外,吲哚菁綠染料的 PEG 修飾可以增加吲哚菁綠染料的疏水性并顯著減少非特異性結合。

表2.吲哚菁綠和吲哚菁綠衍生物的物理和化學性質

產品名稱 Ex/Em (nm) 分子量 反應物/反應基團 修飾
吲哚菁綠 CAS 3599-32-4 788/813 774.96 血漿蛋白 非磺化
吲哚菁綠ICG 酸 788/813 844.98 胺 (-NH2) 和 -OH 非磺化
吲哚菁綠ICG炔烴 788/813 768.03 點擊化學 磺化
吲哚菁綠ICG amine 788/813 1001.08 羰基 (-COOH) 非磺化
吲哚菁綠ICG疊氮化物 788/813 799.05 點擊化學 磺化
吲哚菁綠ICG-ATT 788/813 760.49 胺 (-NH2) 非磺化
ICG酰肼 788/813 973.04 席夫堿化學 磺化
吲哚菁綠ICG 馬來酰亞胺 788/813 853.09 巰基或硫醇 (-SH) 非磺化
吲哚菁綠ICG-Osu 788/813 828.03 胺 (-NH2) 非磺化
吲哚菁綠ICG Xtra-Osu 788/813 1232.62 胺 (-NH2)


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