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首頁 > 技術天地 > iFluor染料及其試劑盒(iFluor Dyes and Kits)

iFluor染料及其試劑盒(iFluor Dyes and Kits)

我們的 iFluor 染料是一系列高水溶性熒光染料,用于共價標記生物分子,如蛋白質和抗體。 提供多種激發-發射曲線,涵蓋紫外-可見光譜到近紅外光譜,有一種 iFluor 染料可匹配任何儀器設置和多種組合以進行多重檢測。 用 iFluor 染料制成的綴合物具有出色的亮度和光穩定性,優于 Alexa Fluor® 偶聯物和其他光譜相似的綴合物。 將 iFluor 產品用于所有免疫熒光分析、細胞成像和流式細胞術應用。

 

iFluor 活性染料

iFluor 活性染料可以共價標記到生物分子上,無需自淬滅,它可產生強熒光綴合物。 iFluor 活性染料形式包括胺反應性琥珀酰亞胺酯、硫醇反應性馬來酰亞胺等。

  • 琥珀酰亞胺酯:經常用于標記蛋白質、抗體、肽、核酸和其他生物分子上的伯胺(-NH3)。它們通常用于制備生物綴合物。適用范圍:免疫化學、熒光原位雜交(FISH)、細胞示蹤、受體標記和熒光類似物細胞化學。
  • 馬來酰亞胺:用于標記硫醇或巰基(-SH)以選擇性修飾指定位置的蛋白質。硫醇反應性染料通常用于制備熒光肽、蛋白質和寡核苷酸,以探測生物學結構、功能和相互作用。
  • 疊氮化物:用于通過銅(I)催化的疊氮化合物(CUAAC)或無銅(I)菌株促進的疊氮化合物點擊化學(SPAAC)反應來標記亞乙基。
  • 炔烴:通過Cu(I)催化的疊氮化合物(CUAAC)或無Cu(I)菌株促進的疊氮化合物點擊化學(SPAAC)反應標記疊氮化合物基團。
  • 羧酸:用于碳二亞胺預活化后的胺標記或用于醇的Steglich酯化反應
  • 胺:用于標記各種親電子化合物,例如活化的酯。

下表是iFluor 活性染料的使用范圍、它們的激發和發射最大值以及它們的熒光團等效物,以幫助您選擇用于標記蛋白質、抗體和其他生物聚合物以及衍生低分子量分子的最佳熒光團。

熒光團 Ex(nm) Em(nm) 胺反應性 硫醇反應性 炔烴反應性 疊氮化物反應性 醛/酮反應性 羰基反應性
iFluor 350 344 448 iFluor 350琥珀酰亞胺酯 iFluor 350馬來酰亞胺     iFluor 350酰肼 iFluor 350胺
iFluor 405 402 425 iFluor 405琥珀酰亞胺酯 iFluor 405馬來酰亞胺     iFluor 405酰肼 iFluor 405胺
iFluor 430 433 495 iFluor 430琥珀酰亞胺酯 iFluor 430馬來酰亞胺        
iFluor 450 451 502 iFluor 450琥珀酰亞胺酯 iFluor 450馬來酰亞胺        
iFluor 488 491 516 iFluor 488琥珀酰亞胺酯 iFluor 488馬來酰亞胺 iFluor 488疊氮化物 iFluor 488炔烴 iFluor 488酰肼 iFluor 488胺
iFluor 514 527 554 iFluor 514琥珀酰亞胺酯          
iFluor 532 543 563 iFluor 532琥珀酰亞胺酯 iFluor 532馬來酰亞胺        
iFluor 546 541 557 iFluor 546琥珀酰亞胺酯          
iFluor 555 556 569 iFluor 555琥珀酰亞胺酯 iFluor 555馬來酰亞胺 iFluor 555疊氮化物 iFluor 555炔烴 iFluor 555酰肼 iFluor 555胺
iFluor 560 559 571 iFluor 560琥珀酰亞胺酯          
iFluor 568 568 587 iFluor 568琥珀酰亞胺酯 iFluor 568馬來酰亞胺        
iFluor 594 587 603 iFluor 594琥珀酰亞胺酯 iFluor 594馬來酰亞胺        
iFluor 610 609 627 iFluor 610琥珀酰亞胺酯          
iFluor 633 638 652 iFluor 633琥珀酰亞胺酯 iFluor 633馬來酰亞胺        
iFluor 647 654 669 iFluor 647琥珀酰亞胺酯 iFluor 647馬來酰亞胺 iFluor 647疊氮化物 iFluor 647炔烴 iFluor 647酰肼 iFluor 647胺
iFluor 660 660 677 iFluor 660琥珀酰亞胺酯         iFluor 660胺
iFluor 670 669 682 iFluor 670琥珀酰亞胺酯          
iFluor 680 683 700 iFluor 680琥珀酰亞胺酯 iFluor 680馬來酰亞胺     iFluor 680酰肼 iFluor 680胺
iFluor 700 690 713 iFluor 700琥珀酰亞胺酯 iFluor 700馬來酰亞胺     iFluor 700酰肼 iFluor 700胺
iFluor 710 712 736 iFluor 710琥珀酰亞胺酯         iFluor 710胺
iFluor 750 759 777 iFluor 750琥珀酰亞胺酯 iFluor 750馬來酰亞胺     iFluor 750酰肼 iFluor 750胺
iFluor 790 786 811 iFluor 790琥珀酰亞胺酯 iFluor 790馬來酰亞胺     iFluor 790酰肼 iFluor 790胺
iFluor 800 801 820 iFluor 800琥珀酰亞胺酯 iFluor 800馬來酰亞胺        
iFluor 810 811 822 iFluor 810琥珀酰亞胺酯 iFluor 810馬來酰亞胺        
iFluor 820 820 849 iFluor 820琥珀酰亞胺酯 iFluor 820馬來酰亞胺        
iFluor 840 836 876 iFluor 840琥珀酰亞胺酯 iFluor 840馬來酰亞胺        
iFluor 860 852 877 iFluor 860琥珀酰亞胺酯 iFluor 860馬來酰亞胺        

 

 

ReadiLink Rapid 和 xtra Rapid iFluor 抗體標記試劑盒

ReadiLink Rapid iFluor 抗體標記試劑盒和BSA 兼容的 ReadiLink xtra Rapid iFluor 抗體標記試劑盒提供了一種快速方便的方法,可以使用我們卓越的 iFluor 染料標記微量抗體。 ReadiLink 試劑盒的獨特化學特性使研究人員無需純化步驟即可輕松標記和回收 100% 的抗體。 由于 ReadiLink 綴合物是共價標記的,因此它們在長期儲存中是穩定的。 它們非常適合熒光顯微鏡、多色成像、多重流式細胞術、初級檢測、IHC、FISH、ELISA 等。 

ReadiLink 快速抗體標記試劑盒的主要特點

  1. ReadiLink xtra Rapid iFluor 抗體標記試劑盒與 BSA 和其他穩定蛋白兼容
  2. 標記單克隆抗體、多克隆抗體或其他蛋白質
  3. 快速簡單的兩步標記方案,無需化學或綴合
  4. 用于標記 100 µg 抗體(50 µg 抗體的兩個獨立標記反應)
  5. 100% 抗體回收率,無需對產品進行純化

圖1. ReadiLink 快速抗體標記試劑盒工作流程

  

表2. ReadiLink Rapid iFluor 抗體標記試劑盒

ReadiLink 抗體標記試劑盒 替代品 Ex/Em (nm) 成像 流式 貨號
ReadiLink Rapid iFluor 350 AMCA, Alexa Fluor® 350 344/448 Yes   1220
ReadiLink xtra Rapid iFluor 350 AMCA, Alexa Fluor® 350 344/448 Yes   1950
ReadiLink Rapid iFluor 488 FITC, Alexa Fluor® 488 491/516 Yes Yes 1255
ReadiLink xtra Rapid iFluor 488 FITC, Alexa Fluor® 488 491/516 Yes Yes 1955
ReadiLink Rapid iFluor 555 Cy3, Alexa Fluor® 555 556/569 Yes   1227
ReadiLink xtra Rapid iFluor 555 Cy3, Alexa Fluor® 555 556/569 Yes   1958
ReadiLink Rapid iFluor 594 Texas Red®, Alexa Fluor® 594 587/603 Yes   1230
ReadiLink xtra Rapid iFluor 594 Texas Red®, Alexa Fluor® 594 587/603 Yes   1960
ReadiLink Rapid iFluor 633 Cy5, Alexa Fluor® 633 638/655 Yes Yes 1260
ReadiLink Rapid iFluor 647 Cy5, Alexa Fluor® 647 654/669 Yes Yes 1235
ReadiLink xtra Rapid iFluor 647 Cy5, Alexa Fluor® 647 654/669 Yes Yes 1963
ReadiLink Rapid iFluor 680 Cy5.5, Alexa Fluor® 680, IRDye® 700 682/701 Yes Yes 1240
ReadiLink Rapid iFluor 700 Alexa Fluor® 700 693/713 Yes Yes 1245
ReadiLink Rapid iFluor 750 Cy7, Alexa Fluor® 750 759/777 Yes   1250
ReadiLink xtra Rapid iFluor 750 Cy7, Alexa Fluor® 750 759/777 Yes   1965
ReadiLink Rapid iFluor 790 IRDye® 800, Alexa Fluor® 790 782/811 Yes Yes 1265

 

iFluor 熒光標記二抗

與明亮且光穩定的 iFluor 染料綴合而成的二抗可用于檢測各種細胞和蛋白質分析研究中的低、中和高豐度目標。 iFluor 二抗可識別人、小鼠或兔的 IgG 重鏈和免疫球蛋白輕鏈(例如 kappa 或 lambda)。使用 iFluor 二抗的優勢包括優異的水溶性、更高的信噪比、增強的靈敏度、多重功能以及在寬摩爾范圍內對 pH 不敏感的熒光。

圖2. iFluor 488 山羊抗小鼠 IgG(貨號 16735)與 FITC 山羊抗小鼠 IgG(貨號 16852)的光漂白率比較。 

表3. iFluor熒光標記二抗相關產品

熒光團 Abs (nm) Ex (nm) 濾波片 抗體 宿主 反應物 貨號
iFluor 350 344 448 DAPI 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16730
iFluor 405 402 425 DAPI 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16731
iFluor 488 491 516 FITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16735
iFluor 514 527 554 TRITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16736
iFluor 532 543 563 TRITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16737
iFluor 546 541 557 TRITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16457
iFluor 555 556 569 TRITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16739
iFluor 568 568 587 Cy3/TRITC 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16470
iFluor 594 587 603 Texas Red 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16741
iFluor 633 638 652 Texas Red 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16743
iFluor 647 654 669 Cy5 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16744
iFluor 680 683 700 Cy5.5 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16745
iFluor 700 690 713 Cy5.5 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16746
iFluor 750 759 777 Cy7 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16748
iFluor 790 786 811 Cy7 抗鼠IgG (H&L) 山羊 小鼠 16750
iFluor 350 344 448 DAPI 抗兔IgG (H&L) 山羊 16795
iFluor 405 402 425 DAPI 抗兔IgG (H&L) 山羊 16796
iFluor 488 491 516 FITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16800
iFluor 514 527 554 TRITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16801
iFluor 532 543 563 TRITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16802
iFluor 546 541 557 TRITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16618
iFluor 555 556 569 TRITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16803
iFluor 568 568 587 Cy3/TRITC 抗兔IgG (H&L) 山羊 16804
iFluor 594 587 603 Texas Red 抗兔IgG (H&L) 山羊 16806
iFluor 633 638 652 Texas Red 抗兔IgG (H&L) 山羊 16808
iFluor 647 654 669 Cy5 抗兔IgG (H&L) 山羊 16809
iFluor 680 683 700 Cy5.5 抗兔IgG (H&L) 山羊 16810
iFluor 700 690 713 Cy5.5 抗兔IgG (H&L) 山羊 16811
iFluor 750 759 777 Cy7 抗兔IgG (H&L) 山羊 16813
iFluor 790 786 811 Cy7 抗兔IgG (H&L) 山羊 16815

 

iFluor Styramide 信號放大試劑

與酪胺信號放大 (TSA) 類似,Power Styramide 信號放大 (PSA ) 利用辣根過氧化物酶 (HRP) 的催化活性將標記的苯乙烯酰胺共價沉積并原位結合到目標蛋白質或核酸序列上。此外,PSA 成像技術可以很容易地添加到任何允許將 HRP 集成到其協議中的應用程序中。 此類應用包括 IHC、ICC、IF、原位雜交和 ELISA。

iFluor Styramide 試劑的主要特性

  1. 檢測靈敏度比標準 IHC、ICC、IF 方法高 100 倍以上
  2. 改進的熒光信號比酪胺 (TSA) 試劑高 10 到 50 倍
  3. iFluor Styramide 自由基的更高反應性允許在 HRP 目標相互作用位點對苯乙烯酰胺偶聯物進行更快、有效和更穩定的標記
  4. 節省寶貴的抗體,iFluor Styramide 標記染料的使用量很少,但不會犧牲檢測靈敏度
  5. 作為 PSA 成像試劑盒,帶有聚 HRP,易于使用,可進行 100 次測試
PSA mulitcolor tissue stain

圖 3. FFPE 組織的多重 Styramide 標記。 組織與兔抗 EpCAM 抗體和小鼠抗泛角蛋白抗體一起孵育,然后用 iFluor 488 PSA羊抗兔IgG成像試劑盒(貨號 45205)和 iFluor 555 PSA成像試劑盒中的試劑標記山羊抗小鼠 IgG(貨號 45220)。 細胞核用 DAPI(貨號 17507)標記

下表是iFluor Styramide 試劑的使用范圍、它們的激發和發射最大值、消光系數和熒光量子產率,以幫助您為基于熒光的成像選擇最佳標記試劑。

產品名稱 Ex/Em (nm) 濾波片組 消光系數 熒光量子產率 規格
iFluor 350 Styramide 345/442 DAPI 20,000 0.95 100 Test
iFluor 488 Styramide 491/514 FITC 75,000 0.9 100 Test
iFluor 546 Styramide 541/557 Cy3/TRITC 100,000 0.67 100 Test
iFluor 555 Styramide 552/567 Cy3/TRITC 100,000 0.64 100 Test
iFluor 568 Styramide 568/587 Cy3/TRITC 100,000 0.57 100 Test
iFluor 594 Styramide 587/603 Cy3/TRITC 180,000 0.53 100 Test
iFluor 647 Styramide 654/669 Cy5 250,000 0.25 100 Test
iFluor 680 Styramide 683/700 Cy5 220,000 0.23 100 Test
iFluor 700 Styramide 690/713 Cy7 220,000 0.23 100 Test
iFluor 750 Styramide 759/777 Cy7 275,000 0.12 100 Test
iFluor 790 Styramide 786/811 Cy7 250,000 0.13 100 Test

 

用于細胞凋亡檢測的 Annexin V iFluor 綴合物

與 iFluor 染料結合的膜聯蛋白 V 提供了一種快速可靠的方法來檢測外化 PS,這是早期細胞凋亡的一個關鍵特征。 Annexin V iFluor 綴合物具有出色的亮度和光穩定性,可用于活細胞成像、免疫熒光和流式細胞術。 它們可以與其他染料(例如核酸染色劑)結合使用,以準確評估凋亡、壞死和死細胞的混合群體。

Annexin V iFluor 綴合物的主要特性

  1. iFluor 綴合物產生更亮、更耐光的信號
  2. 僅與活細胞兼容
  3. 用甲醛染色后可固定
  4. 適用于所有基于熒光的成像平臺
  5. 匹配任何激光設置
  6. 可用于多路復用應用的多色波長
Annexin V iFluor™ 555

圖4. Jurkat 細胞用 1 µM 喜樹堿處理。 使用 Annexin V iFluor 555 綴合物(貨號 20072)檢測外化 PS 殘基,這是細胞凋亡的早期指標。 凋亡細胞和壞死細胞用核綠 DCS1(貨號 17550)染色。

下表是annexin V iFluor 綴合物的參數,希望可以幫助您為基于熒光的成像或流式細胞術實驗選擇最佳的annexin v 綴合物。

Annexin V綴合物 Ex (nm) Em (nm) 濾波片組 ε Φ 規格 貨號
Annexin V-iFluor 350標記 344 344/448 DAPI 20000 0.95 100 tests (200 µL) 20070
Annexin V-iFluor 488標記 491 516 FITC 75000 0.9 100 tests (200 µL) 20071
Annexin V-iFluor 555標記 556 569 TRITC 100000 0.64 100 tests (200 µL) 20072
Annexin V-iFluor 594標記 587 603 Texas Red 180000 0.53 100 tests (200 µL) 20073
Annexin V-iFluor 633標記 638 652 Texas Red 250000 0.29 100 tests (200 µL) 20069
Annexin V-iFluor 647標記 654 669 Cy5 250000 0.29 100 tests (200 µL) 20074
Annexin V-iFluor 680標記 683 700 Cy5.5 220000 0.23 100 tests (200 µL) 20075
Annexin V-iFluor 700標記 690 713 Cy5.5 220000 0.23 100 tests (200 µL) 20077
Annexin V-iFluor 750標記 756 777 Cy7 275000 0.12 100 tests (200 µL) 20076

 

用于 F-肌動蛋白染色的鬼筆環肽 iFluor 綴合物

與傳統的異硫氰酸熒光素 (FITC) 和羅丹明結合物相比,鬼筆環肽-iFluor 綴合物提供的 F-肌動蛋白染色劑在亮度和光穩定性方面都非常出色。 Phalloidin-iFluor 綴合物在性能上與 Alexa Flour® 綴合物相當,并且在大多數情況下優于 Alexa Flour® 綴合物。

鬼筆環肽 iFluor 綴合物的主要特性

  1. 選擇性靶向并結合 F-肌動蛋白,不結合單體 G-肌動蛋白
  2. 兼容甲醛固定樣品和透化組織切片、細胞培養物、無細胞實驗和已脫蠟的石蠟包埋樣品
  3. 可用于多路復用應用的多色波長
  4. 適用于熒光成像平臺
Phalloidin iFluor™ 594

圖5. 使用 Phalloidin iFluor 594(貨號 23122)染色固定和透化 HeLa 細胞的 F-肌動蛋白。

下表是鬼筆環肽-iFluor 綴合物的規格、吸光度和發射最大值、消光系數和熒光量子產率。

鬼筆環肽綴合物 貨號 分子量 Ex/ Em (nm) 濾波片組 消光系數 熒光量子產率 規格
鬼筆環肽-iFluor 350標記 23110 ∼1300 344/448 DAPI 20,000 0.95 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 405標記 23111 ∼1400 402/425 DAPI 37,000 0.91 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 488標記 23115 ∼1900 491/516 FITC 75,000 0.9 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 514標記 23116 ∼1800 527/554 TRITC 80,000 0.83 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 532標記 23117 ∼1800 543/563 TRITC 90,000 0.68 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 555標記 23119 ∼1300 556/569 TRITC 100,000 0.64 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 594標記 23122 ∼1600 587/603 Texas Red 180,000 0.53 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 633標記 23125 1703.99 638/652 Texas Red 250,000 0.29 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 647標記 23127 1632.87 654/669 Cy5 250,000 0.25 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 680標記 23128 ∼2000 683/700 Cy5.5 220,000 0.23 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 700標記 23129 ∼3000 690/713 Cy5.5 220,000 0.23 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 750標記 23130 ∼3300 756/777 Cy7 275,000 0.12 300 Tests
鬼筆環肽-iFluor 790標記 23131 ∼2800 786/811 Cy7 250,000 0.13 300 Tests

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