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首頁 > 技術天地 > Gelite Safe DNA 凝膠染料,最好和最穩定的 DNA 凝膠染料

Gelite Safe DNA 凝膠染料,最好和最穩定的 DNA 凝膠染料

Gelite Safe DNA 凝膠染料是一種極其靈敏且穩定的熒光染料,用于凝膠電泳中的DNA檢測。與劇毒溴化乙錠 (EtBr) 不同,Gelite Safe 危害較小、無細胞毒性和無致突變性,提供比 EtBr 和 SYBR® Safe 更高的靈敏度和更低的背景熒光。 Gelite Safe 獨特的光譜特性擴大了其儀器兼容性,包括紫外線和藍光透射儀、凝膠記錄系統和激光掃描儀,其單一配方設計允許在您方便時在綠色或紅色通道中進行檢測。

Gelite Safe 染色劑可作為濃縮物以水溶液或 DMSO 溶液形式提供,一旦充分稀釋,即可無縫替代標準方案中的 EtBr。 Gelite Safe 也適用于毛細管電泳中的 DNA 染色,并與下游應用兼容,包括純化、克隆和測序。

 

Gelite Safe——溴化乙錠的卓越替代品

凝膠成像和核酸染料常用于生命科學研究,通過電泳對 DNA 片段進行定性評估。雖然溴化乙錠 (EtBr) 由于其低成本和足夠的敏感性多年來一直是主要的凝膠染色劑,但 EtBr 的毒性和致突變危害難以解決且使用不安全。

Gelite Safe 經過專門配制,可作為 EtBr 的替代品,用于檢測瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的 DNA。作為一種不透膜染料,Gelite Safe 不能穿透活細胞并與 DNA 結合,使凝膠幾乎無細胞毒性和無致突變性。Gelite Safe與EtBr 和其他染料相比具有更高的靈敏度和多功能性。

卓越的靈敏度

單獨而言,Gelite Safe 本質上是無熒光的,在凝膠中表現出很低的背景熒光。與 DNA 結合后,Gelite Safe 表現出比 EtBr 高幾個數量級的熒光增強。使用 300 nm 紫外透射儀和 ChemiDoc™ 成像系統 (Bio-Rad®),Gelite Safe 可檢測每條帶低至 0.5 ng dsDNA(圖 1)。無需洗滌步驟是實現最佳靈敏度所必需的,并且由于 Gelite Safe 對 DNA 具有特異性,因此在樣品中存在 RNA 的應用不會干擾結果。

Comparitive Analysis
圖1. 使用 Gelite Safe、EtBr 和 SYBR® Safe 在 TBE 緩沖液中的 1% 瓊脂糖凝膠中檢測 DNA。

更高的安全性

與 EtBr 和 SYBR® Green 相比,在鼠傷寒沙門氏菌菌株 TA1538 中,在 0.2 µg/板至 10 µg/板的劑量范圍內,Gelite Safe 的致突變性非常低,而在艾姆斯試驗中引起的突變更少。在所有劑量中,Gelite Safe 僅在用 S9 部分(一種肝臟提取物)激活后才表現出弱陽性結果。此外,Gelite Safe 的膜不滲透特性可防止染料滲透活細胞并與其 DNA 相互作用,使其幾乎無細胞毒性和致癌性。由于其不滲透性,Gelite Safe 對環境也是安全的,可以快速簡單地處理。

Ames Test
圖2. Ames 的測試結果數據

更好的儀器兼容性

Gelite Safe 的一個顯著特點是其廣泛的激發和發射曲線。因為兩個吸光度的最大值導致了 Gelite Safe 的激發光譜在 ~300 nm 和 ~512 nm,所以它與各種儀器兼容,包括紫外線和藍光透射儀、凝膠文件系統和激光掃描儀。更重要的是,Gelite Safe 的寬發射光譜允許在綠色或紅色通道中進行檢測。 Gelite Safe 與 EtBr、GelStar®、Gel Green、Gel Red 和 SYBR® 濾波片組兼容。

Excitation
Gelite Excitation Spectrum
Emission
Gelite Emission Spectrum
 
 
 
 
 
圖3. 在 DNA 存在下檢測的 Gelite Safe DNA 凝膠染料的激發和發射光譜。 Gelite Safe 在 280 nm 的紫外區和 513 nm 的可見區具有激發最大值。它可以被配備 254 nm(左黑線)、300 nm(中黑線)或 488 nm(藍線)激光器的儀器激發。 Gelite™ 具有寬廣的發射光譜,在 552 nm 處具有單一發射最大值。它可以使用 602/50 nm (EtBr) 或 590/110 nm 濾光片組進行檢測。

 

多功能性

Gelite Safe 適用于檢測瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的 DNA。 Gelite Safe 強大的 DNA 結合親和力允許在電泳之前或之后對凝膠進行染色而無需脫色。為獲得最佳靈敏度,我們建議使用后染色方法,將凝膠在 Gelite Safe 染色溶液中孵育 30 至 60 分鐘,具體取決于您的實驗條件(例如凝膠厚度和成分)。

表1. 相關產品

產品名稱 規格 貨號
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X水溶液* 100 µL 17700
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X水溶液* 500 µL 17701
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X水溶液* 1 mL 17702
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X水溶液* 10 mL 17703
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X DMSO溶液* 100 µL 17704
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X DMSO溶液* 500 µL 17705
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X DMSO溶液* 1 mL 17706
Gelite Safe核酸凝膠染料* 10,000X DMSO溶液* 10 mL 17707

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