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JJ Green核酸染料

貨號TJ1704存儲條件 建議在低于-15℃溫度下冷凍保存
規格500 ul價格500
Ex (nm)497Em (nm)520
分子量溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

JJ Green是一種結合于所有dsDNA雙螺旋小溝區域的具有綠色激發波長的染料。在游離狀態下,JJ Green發出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結合后,熒光大大增強。因此,JJ Green的熒光信號強度與雙鏈DNA的數量相關,可以根據熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數量。JJ Green的最大吸收波長約為497nm,發射波長最大約為520nm。

 

JJ Green是高靈敏的DNA熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡單:無須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。JJ Green 與dsDNA 結合熒光信號會增強800-1000倍,用JJ Green染色的凝膠樣品熒光信號強,背景信號低??蛇m用于多種電泳分析。

JJ Green 適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場凝膠電泳,和毛細管電泳等。

JJ Green 與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對分子生物學中常用的酶(如:Taq 酶、逆轉錄酶、內切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。另外,JJ Green 與EB相比,誘變能力大大降低。

JJ Green 核酸凝膠染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一種高敏感性的熒光染液,用于檢測瓊脂糖凝膠及聚丙烯酰胺凝膠中的雙鏈DNA和寡核苷酸。當染液與核酸結合后,JJ Green 核酸凝膠染液的熒光信號會明顯增強,因此經JJ Green 核酸凝膠染液染色的凝膠顯示出非常好的信躁比,沒有背景熒光。為獲得最佳的結果,凝膠最好在跑膠后再進行染色。JJ Green 核酸凝膠染液用于低含量的PCR產物,凋亡研究及異源雙鏈分析中少量DNA的檢測較為理想??蓱糜冢篋NA和RNA的檢測;SSCP及異源雙鏈分析。



產品說明書

實驗方案

1.JJ Green預染方法

1.1該方法適用于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳

1.2工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的JJ Green稀釋10000倍,即為JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一個月以上。

1.3制膠:按常規方法制膠,不含任何染料。

1.4樣品染色:向分析樣品中加入JJ Green工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使JJ Green與樣品中DNA充分結合。JJ Green工作液加入量為總上樣量的1/10。

1.5DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使JJ Green與DNA充分結合。

1.6上樣、電泳:按常規操作。

 

2.JJ Green后染方法

2.1按照常規方法進行電泳。

2.2用PH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀釋JJ Green濃縮液,混勻,制成3X染色溶液。

2.3將3X染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預先經過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

2.4用藍光透照儀觀測。藍光可透過玻璃,觀測聚丙烯酰胺凝膠時,可直接將托有凝膠的玻璃平皿放入藍光透照儀內觀測。

 

3.JJ Green使用注意事項

3.1在"JJ Green預染色方法"中,電泳時間不要超過2小時,否則JJ Green會從DNA上分離出來,會產生彌散狀條帶。

3.2在常規用酒精沉淀核酸的過程中,JJ Green 可以全部從雙鏈核酸上去掉。

3.3如果想對用 JJ Green 染過的膠進行 Southern blots,建議在預雜化和雜化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射透視下,與雙鏈 DNA 接合的 JJ Green 呈現綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。

3.4JJ Green對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。





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