活細胞染色 CytoTell 橙色

活細胞染色 CytoTell 橙色是美國AAT Bioquest生產的用于活細胞染色的探針，流式細胞儀結合熒光染色是一個強大的分析異質細胞群工具。在所有現有的熒光染料CFSE是一種廣泛用于活細胞分析的優選細胞增殖的指標。然而，這是不可能用CFSE及其熒光素類似物的GFP轉染的細胞，或為其中一個FITC標記的抗體用于自CFSE及其熒光素類似物，具有的激發和發射光譜幾乎相同。 CytoTell 染料是主要的激光線，如405納米， 488納米或633納米多色排放。 CytoTell 染料具有最小的細胞毒性，并且是用于多色應用與任何GFP的細胞系或FITC-標記的抗體，它們激發或發射光譜的熒光明顯不同。 CytoTell 紅色是紅色熒光染料染色的細胞均勻。 CytoTell 紅也可用于標記細胞的長期跟蹤。分析使用兩個參數的曲線可以更好的提供分辨率。細胞標記的細胞CytoTell 紅可以是固定和透化的，適用于使用標準含甲醛固定劑與基于皂苷的透化緩沖液胞內靶標分析。 CytoTell 紅色為630nm的激發峰，并且可以通過紅色（ 633納米）的激光線激發。它具有660nm的峰值發射，可以用一個 660/20通道濾波片（相當于APC的Alexa Fluor ® 647 ，和Cy5 ® ） ，使其與利用GFP或FITC標記的抗體的多色細胞分析中的應用兼容被檢測。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供最優質的活細胞染色 CytoTell 橙色。 

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操作方法

1.準備500 XDMSO儲備溶液

將500μLDMSO加入染料粉末小瓶中，通過渦旋混合均勻，得到500X DMSO儲備溶液。

注意：應及時使用原液; 任何剩余的溶液應等分并在< -20 ^o C冷凍。避免反復凍融循環，避免光照。

2.準備1X染料工作溶液

制備1X 染料工作由d溶液iluting的500X DMSO儲備溶液在1至500   在Hanks（HHBS）和20mM Hepes緩沖液或者您選擇的緩沖液，pH 7 （如1種500X的μL DMSO儲備溶液至500 μL緩沖區）使用前。通過渦旋將它們充分混合。

注意：染料工作溶液的最終濃度應根據經驗確定不同的細胞類型和/或實驗條件。建議在至少在折疊范圍內的濃度下進行測試。例如CytoTell™Red在某些細胞類型中使用的量可能比推薦濃度少得多。

3.用流式細胞儀或熒光顯微鏡分析細胞：

3.1用測試化合物處理細胞一段所需的時間。

3.2離心細胞，每管取1-5×10 ⁵個細胞。

3.3將細胞重懸于500μL 染料工作溶液中（來自步驟2）。

可選：一個可以添加500X DMSO儲備溶液到細胞中的情況下直接介質除去（如，加入1種微升500X DMSO儲備溶液加到500個微升細胞）

3.4在室溫或37 ° C 下用染料溶液孵育細胞10到30分鐘，避光。

3.5從細胞中取出染料工作溶液，用HHBS或您選擇的緩沖液清洗細胞。將細胞重懸于500μL預熱的HHBS或培養基中，每管獲得1-5×10 ⁵個細胞。

3.6使用流式細胞儀或熒光顯微鏡監測推薦的Ex / Em（見表1）的熒光變化。

參考文獻

Cooperation of innate immune cells during Hepatitis C virus infection
Authors: Volker Klöss
Journal: (2017)

CXCL12--CXCR4 Axis Is Required for Contact-Mediated Human B Lymphoid and Plasmacytoid Dendritic Cell Differentiation but Not T Lymphoid Generation
Authors: Hirohito Minami, Keiki Nagaharu, Yoshiki Nakamori, Kohshi Ohishi, Naoshi Shimojo, Yuki Kageyama, Takeshi Matsumoto, Yuka Sugimoto, Isao Tawara, Masahiro Masuya
Journal: The Journal of Immunology (2017): ji1700054

Interaction and Mutual Activation of Different Innate Immune Cells Is Necessary to Kill and Clear Hepatitis C Virus-Infected Cells
Authors: Volker Klöss, Oliver Grünvogel, Guido Wabnitz, Tatjana Eigenbrod, Stefanie Ehrhardt, Felix Lasitschka, Volker Lohmann, Alexander H Dalpke
Journal: Frontiers in Immunology (2017): 1238

Onionin A inhibits ovarian cancer progression by suppressing cancer cell proliferation and the protumour function of macrophages
Authors: Junko Tsuboki, Yukio Fujiwara, Hasita Horlad, Daisuke Shiraishi, Toshihiro Nohara, Shingo Tayama, Takeshi Motohara, Yoichi Saito, Tsuyoshi Ikeda, Kiyomi Takaishi
Journal: Scientific Reports (2016)

Multiplexing analysis of cell proliferation and cellular functions using a new multicolor panel of fluorescent cell proliferation dyes (P1290)
Authors: Jinfang Liao, Qin Zhao, Yibo Wu, Zhenjun Diwu
Journal: The Journal of Immunology (2013): 119--4

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