Cyber Green核酸凝膠染料
貨號 | TJ1700 | 存儲條件 | 建議在低于-15℃溫度下冷凍保存 |
規格 | 500 ul | 價格 | 2950 |
Ex (nm) | 497 | Em (nm) | 521 |
分子量 | 溶劑 | DMSO | |
產品詳細介紹 |
簡要概述
Cyber Green 染料是一種綠色熒光核酸染料,可用于qPCR,解鏈曲線分析,嗜熱解旋酶依賴性擴增(tHDA)的實時監測,常規溶液DNA定量和各種凝膠電泳。 DNA結合的Cyber Green 染料的激發和發射光譜非常接近熒光素(FAM)或SYBR®Green,使染料與配備488 nm氬激光的儀器或任何波長區域的可見光激發兼容。 Cyber Green 染料在熱和水解方面都非常穩定,在日常處理過程中提供了便利。染料本身基本上是非熒光的,但在與dsDNA結合后變得高度熒光。熒光強度至少比溴化乙錠高一個數量級。此外,DNA / Cyber Green 復合物的熒光量子產率比DNA /溴化乙錠的熒光量子產率高5倍以上。它可以在電泳(預染色)之前,以及在電泳(后染色)之后使用,并且通過毛細管電泳分離染色DNA。它也常用于分子生物學,不含酶(例如:Taq酶,逆轉錄酶,內切核酸酶,T4連接酶)抑制,并且不干擾Southern blot(Southern印跡雜交)。
染料特點
高靈敏: 至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍
信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低
操作簡單:無須脫色或沖洗
適用范圍廣:可適用于多種電泳分析
使用方便:不影響其它修飾酶作用
經濟:價格便宜
產品說明書
染色方案
我們發現通過后染色實現了最大的靈敏度,這也消除了染料干擾DNA遷移的可能性。雖然預制方案更方便,但一些DNA樣本可能會出現遷移,強烈建議凝膠運行時間不超過2小時。建議使用以下方案。 可能需要進行一些比較以確定哪一個更符合您的需求。
1.后染色方案
1.1根據您的標準方案運行凝膠。
1.2通過將10,000X儲備試劑稀釋到PH 7.5 - 8緩沖液中制備1X Cyber Green 工作溶液(例如,TAE,TBE或TE優選pH8.0)。
注意:在水中制備的染色溶液不如在緩沖液中制備的染色溶液穩定,必須在24小時內使用,以確保最大的染色靈敏度。另外,在pH低于約7.5或高于8.0的緩沖液中制備的染色溶液不太穩定并且顯示出降低的染色效力。
1.3將凝膠放入合適的聚丙烯容器中。輕輕加入足量的1X染色溶液浸沒凝膠。
注意:不要使用玻璃容器,因為它會吸附染色溶液中的大部分染料。
1.4在室溫下輕輕攪拌凝膠約30分鐘,避光。
注意:染色溶液可以在黑暗中儲存(最好是冷藏)一周,最多重復使用2-3次。
1.5使用254 nm透射儀或使用長路綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。
2.預染色方案
2.1使用標準方案制備瓊脂糖凝膠溶液。
2.2在澆注凝膠前將10,000X Cyber Green™原液試劑以1:10,000稀釋到凝膠溶液中并充分混合。
2.3根據您的標準方案運行凝膠。
2.4使用254 nm透射儀或使用長路徑綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。
3.電泳前的DNA染色
3.1在電泳前,用1:10,000稀釋的染料(TE,TBE或TAE)孵育DNA至少15分鐘。
3.2根據您的標準方案運行凝膠。
3.3使用254 nm透射儀或使用長路綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。