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Cyber Green核酸凝膠染料

貨號TJ1700存儲條件 建議在低于-15℃溫度下冷凍保存
規格500 ul價格2950
Ex (nm)497Em (nm)521
分子量溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

Cyber Green 染料是一種綠色熒光核酸染料,可用于qPCR,解鏈曲線分析,嗜熱解旋酶依賴性擴增(tHDA)的實時監測,常規溶液DNA定量和各種凝膠電泳。 DNA結合的Cyber Green 染料的激發和發射光譜非常接近熒光素(FAM)或SYBR®Green,使染料與配備488 nm氬激光的儀器或任何波長區域的可見光激發兼容。 Cyber Green 染料在熱和水解方面都非常穩定,在日常處理過程中提供了便利。染料本身基本上是非熒光的,但在與dsDNA結合后變得高度熒光。熒光強度至少比溴化乙錠高一個數量級。此外,DNA / Cyber Green 復合物的熒光量子產率比DNA /溴化乙錠的熒光量子產率高5倍以上。它可以在電泳(預染色)之前,以及在電泳(后染色)之后使用,并且通過毛細管電泳分離染色DNA。它也常用于分子生物學,不含酶(例如:Taq酶,逆轉錄酶,內切核酸酶,T4連接酶)抑制,并且不干擾Southern blot(Southern印跡雜交)。

 

染料特點

高靈敏: 至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍

信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低

操作簡單:無須脫色或沖洗

適用范圍廣:可適用于多種電泳分析

使用方便:不影響其它修飾酶作用

經濟:價格便宜



產品說明書

染色方案

我們發現通過后染色實現了最大的靈敏度,這也消除了染料干擾DNA遷移的可能性。雖然預制方案更方便,但一些DNA樣本可能會出現遷移,強烈建議凝膠運行時間不超過2小時。建議使用以下方案。 可能需要進行一些比較以確定哪一個更符合您的需求。

 

1.染色方案

1.1根據您的標準方案運行凝膠。

1.2通過將10,000X儲備試劑稀釋到PH 7.5  -  8緩沖液中制備1X Cyber Green 工作溶液(例如,TAE,TBE或TE優選pH8.0)。

注意:在水中制備的染色溶液不如在緩沖液中制備的染色溶液穩定,必須在24小時內使用,以確保最大的染色靈敏度。另外,在pH低于約7.5或高于8.0的緩沖液中制備的染色溶液不太穩定并且顯示出降低的染色效力。

1.3將凝膠放入合適的聚丙烯容器中。輕輕加入足量的1X染色溶液浸沒凝膠。

注意:不要使用玻璃容器,因為它會吸附染色溶液中的大部分染料。

1.4在室溫下輕輕攪拌凝膠約30分鐘,避光。

注意:染色溶液可以在黑暗中儲存(最好是冷藏)一周,最多重復使用2-3次。

1.5使用254 nm透射儀或使用長路綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。

 

2.預染色方案

2.1使用標準方案制備瓊脂糖凝膠溶液。

2.2在澆注凝膠前將10,000X Cyber Green™原液試劑以1:10,000稀釋到凝膠溶液中并充分混合。

2.3根據您的標準方案運行凝膠。

2.4使用254 nm透射儀或使用長路徑綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。

 

3.電泳前的DNA染色

3.1在電泳前,用1:10,000稀釋的染料(TE,TBE或TAE)孵育DNA至少15分鐘。

3.2根據您的標準方案運行凝膠。

3.3使用254 nm透射儀或使用長路綠色濾光片(如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片)的激光凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。





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