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活性氧 Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒

貨號16055存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格200 Tests價格3840
Ex (nm)576Em (nm)598
分子量溶劑
產品詳細介紹


簡要概述

Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于線粒體檢測的試劑盒,細胞內羥基自由基的檢測對于理解適當的細胞氧化還原調節及其失調對各種病理的影響至關重要。羥基(HO·)是與其他分子高度反應的活性氧(ROS)之一,以實現穩定性。通常,羥基被認為是氧化代謝的有害副產物,其可以在生命系統中引起分子損傷。它顯示平均壽命為10-9秒,可以與幾乎所有生物分子如核DNA,線粒體DNA,蛋白質和膜脂質發生反應。 AAT Bioquest的Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒經過優化,可用于檢測線粒體中的ROS。 MitoROS OH580是活細胞滲透探針,可以快速和選擇性地靶向活細胞中的羥基自由基。當它與OH·反應時產生紅色熒光,并且可以在Ex / Em = 540 / 590nm處容易地讀取。 Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒提供靈敏的熒光探針,可在孵育1小時后檢測活細胞中的OH·。該試劑盒可用于熒光酶標儀和熒光顯微鏡應用。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒。 

活性氧(ROS)篇:包含總ROS和多種活性氧離子檢測試劑大全

 

適用儀器


熒光顯微鏡  
激發: Cy3/TRITC濾波片
發射: Cy3/TRITC濾波片
推薦孔板: 黑色透明
熒光酶標儀  
激發: 540nm
發射: 590nm
cutoff: 570nm
推薦孔板: 黑色透明


產品說明書

96孔板分析示例

概述

準備細胞用MitoROS OH580工作溶液

在37ºC孵育細胞60分鐘

用測試化合物孵育細胞(誘導OH·)

在Ex / Em = 540/590 nm處檢測熒光增加

注意:使用前在室溫下解凍所有組件。

 

操作步驟

1.準備細胞:

1.1對于貼壁細胞:在生長培養基中將細胞過夜,10,000至40,000個細胞/孔/90μL用于96孔板或2,500至10,000個細胞/孔/20μL用于384孔板。

1.2對于非貼壁細胞:從培養基中離心細胞,將細胞沉淀懸浮于培養基中,100,000-200,000細胞/孔/90μL,96孔poly-D賴氨酸平板或25,000-50,000細胞/孔/ 對于384孔聚-D賴氨酸板,20μL。 在實驗之前,在制動器關閉的情況下以800rpm離心板2分鐘。

注意:應對每個細胞系進行單獨評估,以確定最佳細胞密度。

 

2.準備MitoROS OH580方案:

2.1Prepare MitoROS OH580儲備液(500X):將50μLDMSO(組分C)加入MitoROS OH580(組分A)的小瓶中,并充分混合。

注意:25μL重組的MitoROS OH580原液足以容納1個平板。 如果管子密封并且避光,可以將未使用的部分等分并在≤-20℃下儲存超過一個月。避免反復凍融循環。

2.2準備MitoROS OH580工作溶液:將25μL500XDMSO重構的MitoROS OH580儲備溶液(來自步驟2.1)加入10 mL分析緩沖液(組分B)中,并充分混合。 該工作溶液在室溫下穩定至少2小時。

 

3.進行羥基自由基測定:

3.1取出培養基,加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的MitoROS OH580工作溶液(步驟2.2)到細胞板中。將細胞在37ºC孵育1小時。

3.2為了誘導羥基自由基,用37℃的所需緩沖液(如PBS或HHBS)中的文本化合物處理細胞一段所需的時間,避光。

注意1:我們用芬頓反應(10μMCuCl2和100μMH2O2)在37℃處理HeLa細胞1小時,以誘導外源性羥基自由基。詳細信息請參見圖1。

注意2:我們用生長培養基中的PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)在37℃下處理RAW 264.7細胞4小時,以刺激內源性羥基自由基。詳細信息請參見圖2。

3.3用HHBS或DPBS將細胞洗滌2-3次,并向每個孔中加入100μL測定緩沖液(組分B)。

3.4使用具有TRITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號,或使用熒光酶標儀在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下以底部讀取模式測量熒光增加。

 

數據分析

圖1.使用MitoROS OH580(Cat#16055)在HeLa細胞中測量羥基自由基的熒光圖像。 將HeLa細胞與MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小時,然后用HHBS洗滌一次。 芬頓反應:然后將細胞用10μMCuCl2和100μMH2O2在1X HBSS緩沖液中于37℃處理1小時。 對照:將HeLa細胞保持在1X HBSS緩沖液中而不進行處理。 用HHBS洗滌3次后,使用具有TRITC過濾器組(紅色)的熒光顯微鏡測量HeLa細胞。 細胞核用Hoechst 33342(Cat#17530,Blue)染色。

 

圖2.使用MitoROS OH580(Cat#16055)檢測RAW 264.7細胞中的細胞內羥基自由基。 將細胞與MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小時,然后用HHBS洗滌一次。 然后將細胞在沒有或與PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯,10-500ng / mL)在生長培養基中于37℃溫育4小時。 用HHBS洗滌3次后,使用具有TRITC過濾器組的熒光顯微鏡測量HeLa細胞。

 

參考文獻

Oxyl and hydroxyl radical transfer in mitochondrial amidoxime reducing component-catalyzed nitrite reduction
Authors: Yang J, Giles LJ, Ruppelt C, Mendel RR, Bittner F, Kirk ML.
Journal: J Am Chem Soc (2015): 5276

Arbutin, an intracellular hydroxyl radical scavenger, protects radiation-induced apoptosis in human lymphoma U937 cells
Authors: Wu LH, Li P, Zhao QL, Piao JL, Jiao YF, Kadowaki M, Kondo T.
Journal: Apoptosis (2014): 1654

Chloroplast-located BjFer1 together with anti-oxidative genes alleviate hydrogen peroxide and hydroxyl radical injury in cytoplasmic male-sterile Brassica juncea
Authors: Yang J, Liu S, Yang X, Zhang M.
Journal: Mol Biol Rep (2012): 4169

Hydroxyl radical (.OH) played a pivotal role in oridonin-induced apoptosis and autophagy in human epidermoid carcinoma A431 cells
Authors: Yu Y, Fan SM, Song JK, Tashiro S, Onodera S, Ikejima T.
Journal: Biol Pharm Bull (2012): 2148

Excess no predisposes mitochondrial succinate-cytochrome c reductase to produce hydroxyl radical
Authors: Chen J, Chen CL, Alevriadou BR, Zweier JL, Chen YR.
Journal: Biochim Biophys Acta (2011): 491

Postresuscitation syndrome: potential role of hydroxyl radical-induced endothelial cell damage
Authors: Huet O, Dupic L, Batteux F, Matar C, Conti M, Chereau C, Lemiale V, Harrois A, Mira JP, Vicaut E, Cariou A, Duranteau J.
Journal: Crit Care Med (2011): 1712

Endogenous 3,4-dihydroxyphenylalanine and dopaquinone modifications on protein tyrosine: links to mitochondrially derived oxidative stress via hydroxyl radical
Authors: Zhang X, Monroe ME, Chen B, Chin MH, Heibeck TH, Schepmoes AA, Yang F, Petritis BO, Camp DG, 2nd, Pounds JG, Jacobs JM, Smith DJ, Bigelow DJ, Smith RD, Qian WJ.
Journal: Mol Cell Proteomics (2010): 1199

Hyperglycemia induces apoptosis in rat liver through the increase of hydroxyl radical: new insights into the insulin effect
Authors: Frances DE, Ronco MT, Monti JA, Ingaramo PI, Pisani GB, Parody JP, Pellegrino JM, Sanz PM, Carrillo MC, Carnovale CE.
Journal: J Endocrinol (2010): 187

Acarbose reduces myocardial infarct size by preventing postprandial hyperglycemia and hydroxyl radical production and opening mitochondrial KATP channels in rabbits
Authors: Minatoguchi S, Zhang Z, Bao N, Kobayashi H, Yasuda S, Iwasa M, Sumi S, Kawamura I, Yamada Y, Nishigaki K, Takemura G, Fujiwara T, Fujiwara H.
Journal: J Cardiovasc Pharmacol (2009): 25

Endogenous activation of mitochondrial KATP channels protects human failing myocardium from hydroxyl radical-induced stunning
Authors: Maack C, Dabew ER, Hohl M, Schafers HJ, Bohm M.
Journal: Circ Res (2009): 811



說明書
活性氧 Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒.pdf


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