欧美精品黑人粗大|美国三级片|久久精品娱乐亚洲领先
<ins id="ij6oc"></ins>
<xmp id="ij6oc"><ins id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></ins>
<xmp id="ij6oc">
<form id="ij6oc"></form> <ins id="ij6oc"><xmp id="ij6oc">
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<xmp id="ij6oc">
<ins id="ij6oc"></ins>
<xmp id="ij6oc"><xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<xmp id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<form id="ij6oc"></form><xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<form id="ij6oc"></form>

Cell Meter?固定細胞和組織TUNEL細胞凋亡測定試劑盒*藍色熒光*

貨號22857存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格25 Tests價格4884
Ex (nm)411Em (nm)472
分子量溶劑
產品詳細介紹


簡要概述

Cell Meter TUNEL細胞凋亡測定試劑盒是一種強大的工具,可方便地檢測由DNA片段化引起的細胞凋亡。該測定是非放射性且快速的。TUNEL分析使用末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)催化DEAC-dUTP在片段DNA的游離3'-羥基末端的摻入。通過熒光顯微鏡(AMC濾波片組)分析所得的DEAC標記的DNA。它的藍色激發光可以方便地與GFP標記的靶標多路復用。熒光DEAC標記的核苷酸的直接摻入可明顯減少檢測步驟。該試劑盒經過優化,可檢測固定細胞和福爾馬林固定,石蠟包埋的組織切片中的凋亡。

點擊查看光譜

 

適用儀器


流式細胞儀  
激發: 405nm激光
發射: 525/50nm
通道: Pacific Orange通道
熒光顯微鏡  
激發: 紫色濾波片組
發射: 紫色濾波片組
推薦孔板: 黑色透明
 


產品說明書

樣品分析方案

概述

根據需要處理樣品

在冰上用4%甲醛溶液固定細胞30分鐘

在冰上用70%冰冷的乙醇透化細胞60分鐘

將TdT染色溶液添加到樣品中并在37°C下孵育60分鐘

使用帶有Violet濾光片組的熒光顯微鏡檢測熒光強度 

 

工作溶液配制

TdT染色液
對于一項測試,混合以下試劑以使總體積為51 µL;
45 µL TdT反應緩沖液(組分D)
5 µL CoCl2(組分C)
0.5 µL TF5-dUTP(組分B)
0.5 µL TdT酶(組分A)。
注意:TdT染色溶液應立即使用。

 

操作步驟

細胞染色方案

以下方案可用作參考,實際情況應根據需要進行調整。

  1. 根據需要處理樣品。
  2. 用您選擇的緩沖液(例如含Ca +2和Mg +2的 PBS)洗滌樣品。
  3. 通過在PBS中加入100 µL 4%多聚甲醛固定樣品,并在冰上孵育30分鐘。
  4. 除去固定液并用PBS洗滌樣品。
  5. 向樣品中加入100 µL 70%的冰冷乙醇,并在冰上孵育60分鐘。
    注意:樣品在使用前可以在-20°C下保存幾天。
  6. 除去酒精并用PBS洗滌細胞。
    注意:對于陽性對照,將固定樣品與2-5 µg / mL DNAse在含有Ca +2和Mg +2的PBS中于37°C 孵育60分鐘。除去DNAse并徹底清洗細胞,并繼續進行其余操作。
  7. 向樣品中加入50µL TdT染色溶液,并在37°C下孵育60至120分鐘。
  8. 除去TdT工作溶液,并用PBS洗滌樣品。
  9. 將樣品重懸于PBS中,并使用流式細胞儀使用525/50 nm濾光片(Pacific Orange通道)或帶有紫色濾光片組的熒光顯微鏡檢測熒光強度。 

 

組織染色方案

以下方案可用作參考,實際應根據需要進行調整。
去石蠟和水化

  1. 通過將載玻片在Coplin廣口瓶中在室溫下浸入新鮮的二甲苯中5分鐘,從而對組織切片(附著在載玻片上)進行脫蠟。再重復一次。(共2次洗滌)
  2. 將載玻片在室溫下在Coplin廣口瓶中浸入100%乙醇中5分鐘,以洗滌樣品。
  3. 通過在室溫下將載玻片浸入各種濃度的酒精(100、95、85、70、50%)中,分別在室溫下浸泡5分鐘,從而對樣品進行水化處理。
  4. 在室溫下將載玻片浸入0.85%NaCl中5分鐘,以洗滌樣品。
  5. 在室溫下將載玻片浸入PBS中5分鐘,以洗滌樣品。重復一遍。(共2次洗滌) 


固定

  1. 通過在室溫下將載玻片浸入PBS中的4%多聚甲醛溶液中15-20分鐘來固定組織切片。
  2. 在室溫下將載玻片浸入PBS中5分鐘,以洗滌樣品。重復一遍。(共2次洗滌)
  3. 除去液體,然后將載玻片放在平坦的地方。用100 µL 20 µg / mL蛋白酶K溶液處理組織切片。(添加至足夠覆蓋整個組織表面。在室溫下孵育載玻片10分鐘。)
  4. 在室溫下將載玻片浸入PBS中5分鐘,以洗滌樣品。
  5. 通過在室溫下將載玻片浸入PBS中的4%多聚甲醛溶液中15-20分鐘來固定組織切片。
  6. 在室溫下將載玻片浸入PBS中5分鐘,以洗滌樣品。重復一遍。(共2次洗滌) 


染色

  1. 可選:對于陽性對照,將固定的樣品與2-5 µg / mL的DNAse在含有Ca +2和Mg +2的PBS中于37°C 孵育60分鐘。除去DNAse,并用PBS徹底清洗細胞,并繼續進行其余操作。
  2. 向樣品中加入50 µL TdT染色溶液,并在37°C下孵育60至120分鐘。
  3. 除去TdT工作溶液,并用PBS洗滌樣品。
  4. 加入封固劑,并用帶紫色濾光片組的熒光顯微鏡檢測熒光強度。 

 

圖示

圖1.用   HeLa細胞進行TUNEL分析的熒光圖像。 固定HeLa細胞,并在37°C下分別使用和不使用DNAse處理60分鐘。然后將細胞用Cell Meter™固定細胞和組織TUNEL細胞凋亡測定試劑盒(Cat#22855)染色。DNA鏈斷裂在DNAse處理的細胞中表現出強烈的熒光染色。使用紫色濾光片組在熒光顯微鏡下檢測信號。  

 

參考文獻

A Novel Theranostic Combination of Near-infrared Fluorescence Imaging and Laser Irradiation Targeting c-KIT for Gastrointestinal Stromal Tumors.
Authors: Fujimoto, Shota and Muguruma, Naoki and Okamoto, Koichi and Kurihara, Takeshi and Sato, Yasushi and Miyamoto, Yoshihiko and Kitamura, Shinji and Miyamoto, Hiroshi and Taguchi, Takahiro and Tsuneyama, Koichi and Takayama, Tetsuji
Journal: Theranostics (2018): 2313-2328

Multicomponent Synthesis of Some Molecular Hybrid Containing Thiazole Pyrazole as Apoptosis Inducer.
Authors: Kumar, Parvin and Duhan, Meenakshi and Kadyan, Kulbir and Bhardwaj, Jitender Kumar and Saraf, Priyanka and Mittal, Meenu
Journal: Drug research (2018): 72-79

[Salvianolate protects H9c2 cells from hypoxia/reoxygenation injury-induced apoptosis by attenuating mitochondrial DNA oxidative damage].
Authors: Yue, R C and Yang, X L and Zhang, R Y and Liu, S and Liu, J and Zeng, J and Liang, H and Wang, W and Hu, H X and Zeng, C Y
Journal: Zhonghua xin xue guan bing za zhi (2017): 57-63

Caspase 3 as a therapeutic target for regulation of intervertebral disc degeneration in rabbits.
Authors: Sudo, Hideki and Minami, Akio
Journal: Arthritis and rheumatism (2011): 1648-57

Induction of apoptosis and inhibition of PI3K/Akt pathway in PC-3 and LNCaP prostate cancer cells by ethanolic neem leaf extract.
Authors: Gunadharini, Dharmalingam N and Elumalai, Perumal and Arunkumar, Ramachandran and Senthilkumar, Kalimuthu and Arunakaran, Jagadeesan
Journal: Journal of ethnopharmacology (2011): 644-50

[Effect of 5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy on human gastric cancer xenografts in nude mice in vivo].
Authors: Zhou, Guang-jun and Huang, Zong-hai and Yu, Jin-long and Li, Zhou and Ding, Lian-shu
Journal: Zhonghua wei chang wai ke za zhi = Chinese journal of gastrointestinal surgery (2008): 580-3

[Effect of phenylhexyl isothiocyanate on inducing apoptosis of multiple myeloma cells in vitro].
Authors: Lu, Quan-Yi and Wang, Zhao and Liu, De-Long
Journal: Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi (2008): 89-92

[Effect of qihong capsule in inhibiting cell apoptosis induced by Coxsackie virus B].
Authors: Song, Xiao-dong and Wang, Lun and Ji, Bo
Journal: Zhongguo Zhong xi yi jie he za zhi Zhongguo Zhongxiyi jiehe zazhi = Chinese journal of integrated traditional and Western medicine (2005): 511-5

Dual excitation multi- fluorescence flow cytometry for detailed analyses of viability and apoptotic cell transition.
Authors: Mazzini, G and Ferrari, C and Erba, E
Journal: European journal of histochemistry : EJH (2003): 289-98

Co-localization of active caspase-3 and DNA fragmentation (TUNEL) in normal and hyperthermia-induced abnormal mouse development.
Authors: Mirkes, P E and Little, S A and Umpierre, C C
Journal: Teratology (2001): 134-43



說明書
Cell Meter?固定細胞和組織TUNEL細胞凋亡測定試劑盒*藍色熒光*.pdf


欧美精品黑人粗大
<ins id="ij6oc"></ins>
<xmp id="ij6oc"><ins id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></ins>
<xmp id="ij6oc">
<form id="ij6oc"></form> <ins id="ij6oc"><xmp id="ij6oc">
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<xmp id="ij6oc">
<ins id="ij6oc"></ins>
<xmp id="ij6oc"><xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<xmp id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<form id="ij6oc"></form><xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><form id="ij6oc"></form></form>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<xmp id="ij6oc"><form id="ij6oc"><button id="ij6oc"></button></form>
<form id="ij6oc"></form>