Cell Meter 比色法WST-8細胞定量試劑盒

貨號22770存儲條件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
規格1000 Tests價格2544
Ex (nm)460Em (nm)
分子量溶劑
產品詳細介紹


簡要概述

我們的Cell Meter™檢測試劑盒是一套用于監測細胞生存力的工具。有多種參數可用于監測細胞活力。 Cell Meter™比色WST-8細胞定量試劑盒使用水溶性WST-8四唑鹽來定量活細胞的數量。水溶性WST-8四唑鎓鹽在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸鹽存在下進行生物還原后可生成水溶性橙色臜染料。該試劑盒既方便又強大,具有混合讀取格式。 WST-8溶液直接添加到測試池中,不需要預先混合組分。 WST-8四唑鹽被細胞脫氫酶還原為橙色的甲maz產物,可溶于組織培養基。通過監測460 nm處的吸光度增加,甲maz的產生量與活細胞數量成正比。 WST-8溶液的出色穩定性和極小的細胞毒性使該試劑盒可用于需要長時間孵育(例如24至48小時)的測定。 Cell Meter™比色WST-8細胞定量試劑盒提供了一種靈敏的比色測定法,可用于測定增殖和細胞毒性測定中的活細胞數量。檢測靈敏度高于任何其他基于四唑鹽的檢測方法,例如MTT,XTT或MTS等。

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適用儀器


光吸收酶標儀  
吸收: 460nm
推薦孔板: 透明底板


產品說明書

簡要概述

  1. 在96孔板中制備細胞(100 µL /孔)
  2. 每空加入10ul WST-8TM溶液
  3. 在37°C孵育1-4小時
  4. 監測OD = 460 nm處的吸光度

如果將WST-8TM溶液保存在4°C并避光,其穩定性可超過一年。 將其存放在<-20°C的溫度下以便更長的存儲時間。

 

操作步驟

細胞增殖和細胞毒性檢測

  1. 在具有透明底部的組織培養微孔板中培養細胞(5000到10,000個細胞/孔板)。
  2. 將測試化合物添加到細胞中,并在37°C,5%CO2的培養箱中孵育,所需的時間根據具體實驗而定(例如24、48或96小時)。 對于空白孔(不含細胞的培養基),添加相同量的測試化合物。 對于96孔板,建議的總體積為100 µL,對于384孔板,建議的總體積為50 µL。 注意:應單獨評估每種細胞系,以確定增殖或細胞毒性誘導的最佳細胞密度。 對于增殖測定,使用較少的細胞; 對于細胞毒性測定,請使用更多的細胞。
  3. 向每個孔中加入10 µL /孔(96孔板)或5 µL /孔(384孔板)的WST-8TM溶液。
  4. 將板在37°C下孵育1-4小時,避光。 注意:孵育時間可能從30分鐘到過夜,具體取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。 優化每個實驗的孵育時間。
  5. 用吸光度板酶標儀在OD = 460 nm處監測吸光度的增加。

細胞計數檢測

  1. 在具有透明底部的組織培養微孔板中準備細胞培養物。 對于96孔板,建議的總體積為100 µL;對于384孔板,建議的總體積為50 µL。 注意:我們在透明的底部96孔板中使用了連續稀釋的HeLa和Jurkat細胞懸浮液進行測定。
  2. 向每個孔中加入10 µL /孔(96孔板)或5 µL /孔(384孔板)的WST-8TM溶液。
  3. 將板在37°C下孵育1-4小時,避光。 注意:孵育時間可能從30分鐘到過夜,具體取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。 優化每個實驗的孵育時間。
  4. 使用吸光度板讀數器在OD = 460 nm處監測吸光度的增加。

 

數據分析

從空白標準孔獲得的讀數(Abs(460 nm))用作陰性對照。 從其他標準的讀數中減去該值即可得到基線校正值。 然后,繪制標準讀數,以獲得標準曲線和方程式。 該方程式可用于計算細胞數/孔樣品。 我們建議您使用在線線性回歸計算器,該計算器可在以下網址找到:https://www.aatbio.com/tools/linear-logarithmic-semi-log-regression-online-calculator

 

參考文獻

miR-218 inhibits the proliferation of human glioma cells through downregulation of Yin Yang 1
Authors: Yong Gao, Laisheng Sun, Zicheng Wu, Chengmin Xuan, Junxia Zhang, Yongping You, Xincheng Chen
Journal: Molecular Medicine Reports (2017)



說明書
Cell Meter 比色法WST-8細胞定量試劑盒.pdf


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