Amplite 熒光法谷胱甘肽檢測試劑盒 綠色熒光
貨號 | 10055 | 存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
規格 | 200 Tests | 價格 | 2544 |
Ex (nm) | 510 | Em (nm) | 524 |
分子量 | 溶劑 | ||
產品詳細介紹 |
簡要概述
Amplite 熒光法谷氨酸檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測谷氨酸的試劑盒,物系統中半胱氨酸的試劑和試劑盒很少,并且在為數不多的商業化半胱氨酸檢測試劑盒中存在靈敏度較低、操作較冗長等缺點。Amplite熒光法谷胱甘肽分析試劑盒 *綠色熒光*對樣品中谷胱甘肽提供超敏感實驗用于定量。這個試劑盒利用專有的無熒光染料通過與硫醇反應產生強熒光。本試劑盒提供敏感的一步熒光方法,并且在100 ul檢測體積中能檢測到1pmol的半胱氨酸或者谷胱甘肽。本試劑盒可以用于96或384微孔板分析,并且無需任何分步驟,就可以輕易地實現自動化。它的信號可以通過酶標儀在490/520nm處輕易地讀取。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的Amplite 熒光法谷胱甘肽檢測試劑盒。
適用儀器
熒光酶標儀 | |
激發: | 490nm |
發射: | 525nm |
Cutoff: | 515nm |
推薦孔板: | 黑色底板 |
產品說明書
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備GSH工作溶液(50μL)
2.添加GSH標準品或測試樣品(50μL)
3.在室溫下孵育10至60分鐘
4.檢測Ex / Em = 490/525 nm處的熒光增加(cut off= 515 nm)
溶液制備
1.儲備溶液
1.1 GSH標準溶液(1 mM):
將200μL測定緩沖液(組分B)加入到GSH標準品(組分C)的小瓶中以制備1mM(1nmol /μL)GSH標準溶液。
1.2 Thiolite Green原液(100X):
將100μLDMSO(組分D)加入到Thiolite Green(組分A)的小瓶中以制備100X Thiolite Green原液。
2.標準溶液
2.1醛標準溶液
將30μL的1mM(1nmol /μL)GSH標準溶液加入到970μL的測定緩沖液(組分B)中以產生30μM(30pmol /μL)GSH標準溶液。 取30μM(30 pmol /μL)GSH標準溶液,進行1:3連續稀釋,得到用分析緩沖液(組分B)連續稀釋的GSH標準品(SD7-SD1)。 注意:稀釋的GSH標準溶液不穩定。 在4小時內使用。
3.工作溶液
將50μL 100XThiolite Green原液加入5 mL分析緩沖液(組分B)中,充分混合,制成GSH工作溶液。
樣品分析
表1.實心黑色96孔微孔板中GSH標準品和測試樣品的布局。 SD = GSH標準品(SD1 - SD7,0.01至10μM); BL =空白對照; TS =測試樣品
BL | BL | TS | TS |
SD1 | SD1 | ... | ... |
SD2 | SD2 | ... | ... |
SD3 | SD3 | ||
SD4 | SD4 | ||
SD5 | SD5 | ||
SD6 | SD6 | ||
SD7 | SD7 |
表2.每個孔的試劑組成
孔 | 容積 | 試劑 |
SD1-SD7 | 50ul | 連續稀釋液(0.01至10μM) |
BL | 50ul | 分析緩沖液 |
TS | 50ul | 測試樣本 |
1.根據表1和2中提供的布局制備GSH標準品(SD),空白對照品(BL)和測試樣品(TS)。對于384孔板,每孔使用25μL試劑代替50μL。 注意:根據需要處理細胞或組織樣本。
2.在GSH標準品,空白對照和測試樣品的每個孔中加入50μLGSH工作溶液,使總測定體積為100μL/孔。 對于384孔板,在每個孔中加入25μLGSH工作溶液,總體積為50μL/孔。
3.在室溫下孵育反應10至60分鐘,避光。
4.用熒光酶標儀在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下檢測熒光增加。
參考文獻
Comparison of different methods to study effects of silver nanoparticles on the pro-and antioxidant status of human keratinocytes and fibroblasts
Authors: Sebastian Ahlberg, Fiorenza Rancan, Matthias Epple, Kateryna Loza, David Höppe, Jürgen Lademann, Annika Vogt, Burkhard Kleuser, Christian Gerecke, Martina C Meinke
Journal: Methods (2016)
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