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Amplite 熒光法Caspase 3/7活性檢測試劑盒 紅色熒光

貨號13504存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格100 tests價格4488
Ex (nm)532Em (nm)619
分子量溶劑
產品詳細介紹


簡要概述

Amplite 熒光法Caspase 3/7活性檢測試劑盒 紅色熒光AAT Bioquest研發的用于檢測半胱天冬酶活性的試劑盒。半胱天冬酶在細胞凋亡和細胞信號傳導中起重要作用。 Caspase 3/7(CPP32 / apopain)的激活對于細胞凋亡的起始是重要的。 Caspase 3/7也被鑒定為藥物篩選靶標。半胱天冬酶抑制劑具有抗癌和其他藥理學潛力。已經證明caspase 3/7對肽序列Asp-Glu-Val-Asp(DEVD)具有底物選擇性。我們的Amplite™熒光Caspase 3/7檢測試劑盒使用Z-DEVD-ProRed™作為caspase的熒光指示劑-3活動。通過Caspase 3/7切割ProRed DEVD阻斷肽殘基產生強烈紅色熒光ProRed,其在~620nm下熒光測量,激發~535nm。Amplite 熒光法Caspase 3/7活性檢測試劑盒 紅色熒光可用于測量細胞提取物和純化酶中caspase 3/7的活性,以及??篩選caspase 3/7抑制劑。該試劑盒以96孔格式每孔使用100μl試劑,提供足夠的試劑進行100次分析。該試劑盒以384孔的形式每孔使用25ul試劑,提供足夠的試劑進行400次分析。百螢生物是AAT Bioquest 的中國代理商,為您提供最優質的Caspase 檢測試劑/試劑盒。

 

適用儀器


熒光酶標儀  
激發: 535nm
發射 620nm
cutoff: 610nm
推薦孔板: 黑色孔板


產品說明書

96孔板的測定方案

 

概述

用測試化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)

制備細胞體積的半胱天冬酶3/7測定溶液

在室溫下孵育1小時

在Ex / Em = 535 / 620nm處監測熒光強度

 

操作方法

1.準備細胞:

1.1對于粘附細胞:在生長培養基中將細胞在20,000至80,000個細胞/孔/ 90L下過夜,96孔板或5,000至20,000個細胞/孔/ 20L,用于384孔板。

1.2對于非粘附細胞:從培養基中離心細胞,然后將細胞沉淀懸浮于培養基中,培養基濃度為80,000至200,000細胞/孔/ 90L,用于96孔poly-D賴氨酸平板或20,000至50,000細胞/孔/ 20L用于384孔聚-D賴氨酸板。 在實驗之前,在制動器關閉的情況下以800rpm離心板2分鐘。

注意:應對每個細胞系進行單獨評估,以確定誘導細胞凋亡的最佳細胞密度。

2.準備庫存解決方案:

2.1在使用前,在室溫下使用組分A,B,C(如果需要,組分D和E)。

2.2如果需要,制備1mM Caspase 3/7抑制劑Ac-DEVD-CHO儲備液:將100μLDMSO(未提供)直接加入到Ac-DEVD-CHO小瓶(組分D)中。 該抑制劑可用于確認熒光信號強度與Caspase 3/7樣蛋白酶活性之間的相關性。

注意:應將未使用的抑制劑儲備液等分并在-20°C下干燥儲存。

3.準備Caspase 3/7檢測溶液:

將50μL200X胱天蛋白酶3/7底物儲備溶液(組分A)和100μL1MDTT溶液(組分C)加入10mL測定緩沖液(組分B)中,并充分混合。

注意:50μL的200X caspase 3/7底物儲備液足以進行100次測定,每次測定的反應體積為100μL。 未使用的200X caspase 3/7底物儲備液應等分,在-20°C干燥儲存,避光。

4.運行Caspase 3/7測定:

4.1通過將10μL10X測試化合物(96孔板)或5μL5X測試化合物(384-板)加入PBS或所需緩沖液中來處理細胞。 對于空白孔(沒有細胞的培養基),加入相應量的化合物緩沖液。

4.2將細胞板在培養箱中孵育一段所需的時間(用喜樹堿處理的Jurkat細胞4-6小時)以誘導細胞凋亡。

4.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的半胱天冬酶3/7測定溶液(來自步驟3)。

4.4將板在室溫下孵育至少1小時,避光。

注1:如果需要,在室溫下加入測定溶液10分鐘前,將1L Caspase 3/7抑制劑Ac-DEVD-CHO的1mM儲備液(來自步驟2.2)加入選定的樣品中,以確認Caspase 3 / 7個類似的活動。

注2:如果需要,通過將5mM R110標準品(組分E)稀釋到生長培養基中制備R110標準曲線,得到系列稀釋的R110標準品,范圍為0-50M。將100μL連續稀釋的R110標準品加入含有的孔中。 在測量熒光之前的任何時間,100μLCaspase3/7測定溶液。 該標準曲線可用于測定含有胱天蛋白酶3/7的反應中產生的產物的摩爾數。

4.5在制動器關閉的情況下,以800rpm離心細胞板(特別是對于非粘附細胞)2分鐘。

4.6在Ex / Em = 490 / 525nm處觀察熒光增加。

 

數據分析

        從具有細胞的那些孔值中減去具有生長培養基的空白孔中的熒光??瞻卓椎谋尘盁晒飧鶕L培養基或微量滴定板的來源而變化。

圖1. Jurkat細胞中Caspase 3/7活性的檢測。 將Jurkat細胞在同一天以200,000個細胞/ 90L /孔接種在Costar黑壁/透明底96孔板中。 用終濃度為1M的星形孢菌素處理細胞5小時,而未處理的細胞用作對照。 加入半胱天冬酶3/7測定溶液(100μL/孔)并在室溫下溫育1小時。 用FlexStation熒光酶標儀(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm下測量熒光強度。

 

參考文獻

High STMN1 level is associated with chemo-resistance and poor prognosis in gastric cancer patients
Authors: Tuya Bai, Takehiko Yokobori, Bolag Altan, Munenori Ide, Erito Mochiki, Mitsuhiro Yanai, Akiharu Kimura, Norimichi Kogure, Toru Yanoma, Masaki Suzuki
Journal: British Journal of Cancer (2017)

The trivalent cerium-induced cell death and alteration of ion flux in sweetpotato [Ipomoea batatas (L.) Lam]
Authors: Jiaojiao Jiang, Jianzhong Hu, Zeyi Xie, Qinghe Cao, Daifu Ma, Yonghua Han, Zongyun Li
Journal: Journal of Rare Earths (2017)

Uncarboxylated Osteocalcin Induces Antitumor Immunity against Mouse Melanoma Cell Growth
Authors: Yoshikazu Hayashi, Tomoyo Kawakubo-Yasukochi, Akiko Mizokami, Mai Hazekawa, Tomiko Yakura, Munekazu Naito, Hiroshi Takeuchi, Seiji Nakamura, Masato Hirata
Journal: Journal of Cancer (2017): 2478--2486

Docetaxel induces Bcl-2-and pro-apoptotic caspase-independent death of human prostate cancer DU145 cells
Authors: Takeharu Ogura, Yoshiyuki Tanaka, Hiroki Tamaki, Mamoru Harada
Journal: International journal of oncology (2016): 2330--2338

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

Identification of an allosteric small-molecule inhibitor selective for the inducible form of heat shock protein 70
Authors: Matthew K Howe, Khaldon Bodoor, David A Carlson, Philip F Hughes, Yazan Alwarawrah, David R Loiselle, Alex M Jaeger, David B Darr, Jamie L Jordan, Lucas M Hunter
Journal: Chemistry & biology (2014): 1648--1659



說明書
Amplite 熒光法Caspase 3/7活性檢測試劑盒 紅色熒光.pdf


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