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MitoLite 線粒體綠色熒光探針

貨號22695存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格10x50 ug價格1896
Ex (nm)508Em (nm)528
分子量671.88溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

MitoLite 線粒體綠色熒光探針是美國AAT Bioquest生產的用于染色線粒體的熒光探針,MitoLite Green FM與MitoTracker Green FM(M7514,ThermoFisher)是同一分子。它是綠色熒光的線粒體染色劑。與其他MitoLite探針不同,MitoLite Green FM定位于線粒體,對線粒體膜電位的依賴性要小得多。該染料能染色活細胞,但醛固定后不能很好地保留。它是少數可以染色死細胞線粒體的線粒體探針之一。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的MitoLite 線粒體綠色熒光探針。

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適用儀器


流式細胞儀  
激發: 488nm激光
發射: 530/30nm濾波片
通道: FITC通道
熒光顯微鏡  
激發: FITC濾波片
發射: FITC濾波片
推薦孔板: 黑色透明


產品說明書

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備1 mM MitoLite Green FM儲備溶液
2.準備20-200 nM MitoLite Green FM染色液
3.從細胞中去除生長培養基
4.向細胞添加MitoLite Green FM染色液
5.在37°C孵育30分鐘
6.洗滌細胞并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer(HH緩沖液)代替
7.使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞

 

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
MitoLite Green FM儲備溶液:
將一小瓶MitoLite Green FM(50 ug)溶于74 uL優質無水二甲基亞砜(DMSO)中,制成1 mM儲備液。 注意:將儲備溶液保持在≤–15°C的溫度下冷凍并避光。

 

2.工作溶液配制

MitoLite Green FM染色液:
在HH緩沖液中稀釋1 mM MitoLite Green FM儲備溶液至最終工作濃度。 工作濃度可以在20–200 nM的范圍內。

 

樣品示例及操作

1.染色貼壁細胞:

1.1生長細胞以達到所需的融合度。

1.2從細胞中去除生長培養基。

1.3向每個孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。

1.4在37°C下孵育30分鐘。

1.5洗滌細胞,并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer(HH緩沖液)代替。

1.6使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞。 注意:染色方案對Hela細胞系有益,可能需要針對特定細胞類型進行優化。
 
2.染色懸浮細胞:

2.1離心細胞至沉淀并吸出上清液。

2.2在MitoLite Green FM染色溶液中輕輕重懸細胞。

2.3在37°C下孵育30分鐘。

2.4離心細胞,除去上清液,然后將細胞重懸在新鮮的HH緩沖液中。

2.5可以通過流式細胞儀(530/30 nm濾光片-FITC通道)或熒光顯微鏡(FITC濾光片組)分析細胞。
 
 

圖1 使用帶有FITC濾光片組(綠色)的熒光顯微鏡,用MitoLite Green FM染色的HeLa細胞的熒光圖像。 活細胞與溶酶體染料LysoBrite Red(Cat#22645,紅色)和細胞核染料Nuclear Violet LCS1(Cat#17543,藍色)共同染色。

 

參考文獻

the influence of platelets and a comparison of analytical approaches
Authors: Hopkinson, K.; Williams, E. A.; Fairburn, B.; Forster, S.; Flower, D. J.; Saxton, J. M.; Pockley, A. G., A MitoTracker Green-based flow cytometric assay for natural killer cell activity: variability
Journal: Exp Hematol (2007): 350-7

Efficacy of MitoTracker Green and CMXrosamine to measure changes in mitochondrial membrane potentials in living cells and tissues
Authors: Pendergrass, W.; Wolf, N.; Poot, M.
Journal: Cytometry A (2004): 162-9

Mitotracker green is a P-glycoprotein substrate
Authors: Marques-Santos, L. F.; Oliveira, J. G.; Maia, R. C.; Rumjanek, V. M.
Journal: Biosci Rep (2003): 199-212

MitoTracker Green labeling of mitochondrial proteins and their subsequent analysis by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection
Authors: Presley, A. D.; Fuller, K. M.; Arriaga, E. A.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2003): 141-50

and MitoTracker Green is affected by mitochondrial membrane potential altering drugs
Authors: Keij, J. F.; Bell-Prince, C.; Steinkamp, J. A., Staining of mitochondrial membranes with 10-nonyl acridine orange, MitoFluor Green
Journal: Cytometry (2000): 203-10

 

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產品名稱 貨號
MitoLite 線粒體藍色熒光探針 Cat#22674
MitoLite 線粒體紅色熒光探針 Cat#22677
MitoLite 線粒體深紅色熒光探針 Cat#22678


說明書
MitoLite 線粒體綠色熒光探針.pdf


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