MitoLite 線粒體綠色熒光探針
 | 貨號 | 22695 | 存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 規格 | 10x50 ug | 價格 | 1896 | |
| Ex (nm) | 508 | Em (nm) | 528 | |
| 分子量 | 671.88 | 溶劑 | DMSO | |
| 產品詳細介紹 | ||||
簡要概述
MitoLite 線粒體綠色熒光探針是美國AAT Bioquest生產的用于染色線粒體的熒光探針，MitoLite Green FM與MitoTracker Green FM（M7514，ThermoFisher）是同一分子。它是綠色熒光的線粒體染色劑。與其他MitoLite探針不同，MitoLite Green FM定位于線粒體，對線粒體膜電位的依賴性要小得多。該染料能染色活細胞，但醛固定后不能很好地保留。它是少數可以染色死細胞線粒體的線粒體探針之一。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供最優質的MitoLite 線粒體綠色熒光探針。
適用儀器
| 流式細胞儀 | |
| 激發： | 488nm激光 |
| 發射： | 530/30nm濾波片 |
| 通道： | FITC通道 |
| 熒光顯微鏡 | |
| 激發： | FITC濾波片 |
| 發射： | FITC濾波片 |
| 推薦孔板： | 黑色透明 |
產品說明書
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備1 mM MitoLite Green FM儲備溶液
2.準備20-200 nM MitoLite Green FM染色液
3.從細胞中去除生長培養基
4.向細胞添加MitoLite Green FM染色液
5.在37°C孵育30分鐘
6.洗滌細胞并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH緩沖液）代替
7.使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞
溶液配制
1.儲備溶液配制
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
MitoLite Green FM儲備溶液：
將一小瓶MitoLite Green FM（50 ug）溶于74 uL優質無水二甲基亞砜（DMSO）中，制成1 mM儲備液。 注意：將儲備溶液保持在≤–15°C的溫度下冷凍并避光。
2.工作溶液配制
MitoLite Green FM染色液：
在HH緩沖液中稀釋1 mM MitoLite Green FM儲備溶液至最終工作濃度。 工作濃度可以在20–200 nM的范圍內。
樣品示例及操作
1.1生長細胞以達到所需的融合度。
1.2從細胞中去除生長培養基。
1.3向每個孔中添加MitoLite Green FM染色溶液。
1.4在37°C下孵育30分鐘。
1.5洗滌細胞，并用1x Hanks和20mM Hepes Buffer（HH緩沖液）代替。
1.6使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞。 注意：染色方案對Hela細胞系有益，可能需要針對特定細胞類型進行優化。
2.1離心細胞至沉淀并吸出上清液。
2.2在MitoLite Green FM染色溶液中輕輕重懸細胞。
2.3在37°C下孵育30分鐘。
2.4離心細胞，除去上清液，然后將細胞重懸在新鮮的HH緩沖液中。
2.5可以通過流式細胞儀（530/30 nm濾光片-FITC通道）或熒光顯微鏡（FITC濾光片組）分析細胞。
圖1 使用帶有FITC濾光片組（綠色）的熒光顯微鏡，用MitoLite Green FM染色的HeLa細胞的熒光圖像。 活細胞與溶酶體染料LysoBrite Red（Cat＃22645，紅色）和細胞核染料Nuclear Violet LCS1（Cat＃17543，藍色）共同染色。
參考文獻
the influence of platelets and a comparison of analytical approaches
Authors: Hopkinson, K.; Williams, E. A.; Fairburn, B.; Forster, S.; Flower, D. J.; Saxton, J. M.; Pockley, A. G., A MitoTracker Green-based flow cytometric assay for natural killer cell activity: variability
Journal: Exp Hematol (2007): 350-7
Efficacy of MitoTracker Green and CMXrosamine to measure changes in mitochondrial membrane potentials in living cells and tissues
Authors: Pendergrass, W.; Wolf, N.; Poot, M.
Journal: Cytometry A (2004): 162-9
Mitotracker green is a P-glycoprotein substrate
Authors: Marques-Santos, L. F.; Oliveira, J. G.; Maia, R. C.; Rumjanek, V. M.
Journal: Biosci Rep (2003): 199-212
MitoTracker Green labeling of mitochondrial proteins and their subsequent analysis by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection
Authors: Presley, A. D.; Fuller, K. M.; Arriaga, E. A.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2003): 141-50
and MitoTracker Green is affected by mitochondrial membrane potential altering drugs
Authors: Keij, J. F.; Bell-Prince, C.; Steinkamp, J. A., Staining of mitochondrial membranes with 10-nonyl acridine orange, MitoFluor Green
Journal: Cytometry (2000): 203-10
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