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蛋白酶熒光底物Z-Gly-Pro-AMC

貨號13477存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格5 mg價格1236
Ex (nm)341Em (nm)441
分子量463.49溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

蛋白酶熒光底物Z-Gly-Pro-AMC是美國AAT Bioquest生產的用于Caspase的試劑,Z-Gly-Pro-AMC是用于測定脯氨酸后裂解酶(脯氨酰內肽酶)的熒光底物。 該底物被脯氨酰內肽酶水解,產生高度熒光的7-酰氨基-4-甲基香豆素(AMC)。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的蛋白酶熒光底物Z-Gly-Pro-AMC。 

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產品說明書

樣品操作及分析

以下協議僅提供指導,應根據您的特定需求進行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常規解決方案胱天蛋白酶測定

1.在DMSO中準備10 mM的儲備溶液。

2.如下準備2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.將等體積的半胱天冬酶標準品或樣品與2X半胱天冬酶底物測定溶液混合,并在室溫下孵育至少1小時。

4.使用熒光酶標儀監測熒光,或使用酶標儀監測吸光度。

 

使用細胞滲透性FMK Caspase探針的細胞Caspase測定

1.在DMSO中準備2-5 mM的儲備溶液。

2.根據需要處理細胞。

3.通過用20 mM Hepes緩沖液(HHBS)在Hanks中稀釋DMSO儲備溶液(來自步驟2.1),制備2X滲透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.將等體積的處理過的細胞與2X半胱天冬酶底物測定溶液混合(來自步驟2.3),并在37°C,5%CO2的培養箱中孵育細胞至少1小時。

5.用HHBS清洗細胞至少一次。

6.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。

 

使用細胞滲透性FMK Caspase探針進行細胞半胱天冬酶測定(僅適用于#13470-13476)

1.通過向小瓶中加入50 µL DMSO制備250X儲備液。

2.根據需要處理細胞。

3.以1:250的比例將250 X DMSO儲備溶液添加到細胞溶液中(例如2 µL至500 µL細胞),并將細胞在37°C,5%CO2的培養箱中孵育1小時。

4.用HHBS清洗細胞至少一次。

5.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。

 

參考文獻

Antiplasmin-cleaving enzyme is a soluble form of fibroblast activation protein
Authors: Lee KN, Jackson KW, Christiansen VJ, Lee CS, Chun JG, McKee PA.
Journal: Blood (2006): 1397

Substrate-dependent, non-hyperbolic kinetics of pig brain prolyl oligopeptidase and its tight binding inhibition by JTP-4819
Authors: Venalainen JI, Juvonen RO, Forsberg MM, Garcia-Horsman A, Poso A, Wallen EA, Gynther J, Mannisto PT.
Journal: Biochem Pharmacol (2002): 463



說明書
蛋白酶熒光底物Z-Gly-Pro-AMC.pdf


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