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胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物(Z-DEVD)2-R110 綠

貨號13430存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格1 mg價格1236
Ex (nm)500Em (nm)522
分子量1515.44溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物(Z-DEVD)2-R110 綠是美國AAT Bioquest生產的熒光底物,(Z-DEVD)2-R110是Caspase 9的熒光底物。因為高純的羅丹明110(R110)衍生底物被置于內酯的構型內,因此是無色的,也不發出熒光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而獲得具有強烈熒光的R110產物,該產物可在480nm(最常見的熒光檢測儀上都具有這種激發光源)處被激發后,在510nm-530 nm處用熒光法檢測。R110衍生的Caspase底物可能是被廣泛用于檢測多種Caspase酶活性的底物中最靈敏的熒光底物。我們的R110衍生底物是高純度的,并保證經HPLC檢測不出R110,因這些殘留的R11可能會產生顯著的本底干擾。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物(Z-DEVD)2-R110 綠。

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產品說明書

樣品實驗方案

以下說明書僅提供指南,實際應根據您的具體需求進行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase測定

1.1在DMSO中制備10mM儲備溶液。

1.2制備2X半胱天冬酶底物(50μM)測定溶液,如下所示:

50 L基質原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris緩沖液(20mM),pH = 7.4

1.3將等體積的半胱天冬酶標準品或樣品與2X半胱天冬酶底物測定溶液(來自步驟1.2)混合,并在室溫下孵育溶液至少1小時。

1.4使用熒光酶標儀檢測熒光,或使用吸光度酶標儀檢測吸光度。

 

2.細胞Caspase檢測使用細胞滲透FMK半胱天冬酶探針

2.1在DMSO中制備2-5mM儲備溶液。

2.2根據需要對細胞進行處理。

2.3通過用20mM Hepes緩沖液(HHBS)稀釋Hanks中的DMSO儲備溶液(來自步驟2.1),制備2X可滲透的半胱天冬酶底物(20μM)測定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物測定溶液(來自步驟2.3)混合等體積的處理細胞,并將細胞在37℃,5%CO 2培養箱中孵育至少1小時。

2.5用HHBS洗滌細胞至少一次。

2.6用流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。

 

3.細胞Caspase檢測使用細胞滲透性FMK Caspase探針(僅適用于#13470-13476)

3.1通過向小瓶中加入50μLDMSO制備250X儲備溶液。

3.2根據需要對細胞進行處理。

3.3將250 X DMSO儲備溶液(來自步驟3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL細胞)添加到細胞溶液中,并將細胞在37°C,5%CO 2培養箱中孵育1 小時。

3.4用HHBS洗滌細胞至少一次。

3.5用流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。

 

參考文獻

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213--72223

 

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產品名稱 貨號
胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 綠 Cat#13406
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胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物Ac-DEVD-AMC 藍 Cat#13402


說明書
胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物(Z-DEVD)2-R110 綠.pdf


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