iFluor 555炔烴
 | 貨號 | 1092 | 存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 規格 | 1 mg | 價格 | 2544 | |
| Ex (nm) | 557 | Em (nm) | 570 | |
| 分子量 | 875.94 | 溶劑 | DMSO | |
| 產品詳細介紹 | ||||
簡要概述
iFluor 555炔烴是美國AAT Bioquest生產的用于標記蛋白/抗體的試劑，AAT Bioquest的iFluor 染料經過優化，可用于標記蛋白質，特別是抗體。這些染料是明亮的，光穩定的并且對蛋白質具有最小的猝滅。熒光儀器的主要激光線（例如，350,405,488,555和633nm）可以很好地激發它們。 iFluor 555染料的熒光激發和發射最大值分別為~550nm和~570nm。 iFluor 555系列的光譜特性基本上與Cy3®相同（Cy3®是GE Healthcare的商標）。與Cy3探針相比，iFluor 555家族具有更強的熒光和更高的光穩定性。這些光譜特性使這種新型染料系列成為Cy3®的優良替代品。 iFluor 555系列已成為Cy3®和AlexaFluor®555標記染料（Cy3®和AlexaFluor®是Invitrogen和GE Health Care的商標）的絕佳替代品。 iFluor 555炔烴相當穩定，在點擊化學中與疊氮基表現出良好的反應性和選擇性。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供最優質的iFluor 555炔烴。
產品說明書
操作方案
標記寡核苷酸
1.準備以下試劑：
200mMTHPTA [tris（3-羥丙基三唑基甲基）胺]水溶液
100mM CuSO4水溶液
炔烴修飾的低聚水溶液（盡可能濃縮，> 10 mg / mL）
100 mM抗壞血酸鈉水溶液
10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液（有關推薦的溶劑，請參閱我們的網站）
2.在反應前將CuSO4與THPTA以1：2的比例混合并充分渦旋幾分鐘。該溶液在冷凍時可穩定數周。
3.向炔烴改性的低聚物溶液中加入過量的染料疊氮化物（摩爾比為2-5當量）。
4.加入5當量的THPTA / CuSO4工作溶液（來自步驟1）。
5.加入10-30當量的抗壞血酸鈉。
6.在室溫下攪拌，渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。
7.乙醇通過所需方法（例如HPLC）沉淀或純化寡聚物。
標記肽
1.準備以下試劑：
200 mM THPTA配體水溶液
100mM CuSO4水溶液
炔烴修飾肽水溶液或DMF溶液（取決于您的肽溶解度，> 10 mg / mL）
100 mM抗壞血酸鈉水溶液
10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液（有關推薦的溶劑，請參閱我們的網站）
2.在反應前幾分鐘以1：2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。 該溶液在冷凍時可穩定數周。
3.向炔烴修飾的肽溶液中加入過量的染料疊氮化物（摩爾比為5-10當量）。
4.加入5-10當量的THPTA / CuSO4。
5.加入10-20當量的抗壞血酸鈉。
6.在室溫下攪拌，渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。
7.通過HPLC純化您想要的肽。
標記炔烴有機小分子
1.準備以下試劑：
200 mM THPTA配體水溶液
100mM CuSO4水溶液
炔烴化合物水溶液或DMF溶液（取決于您的化合物溶解度，> 10mg / mL，）
100 mM抗壞血酸鈉水溶液
10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液（有關推薦的溶劑，請參閱我們的網站）。
2.在反應前幾分鐘以1：2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。當冷凍時，該溶液可穩定數周。
3.向炔烴溶液中加入過量的染料疊氮化物（摩爾比為5-10當量）。
4.加入25當量的THPTA / CuSO4。
5.加入50當量的抗壞血酸鈉。
6.在室溫下攪拌反應混合物30-60分鐘。
7.通過色譜或其他方法純化您想要的分子。
標記生物聚合物
1.準備以下試劑：
200 mM THPTA配體水溶液
100mM CuSO4水溶液
炔烴改性的水中生物聚合物（盡可能濃縮，> 5毫克/毫升）
100 mM抗壞血酸鈉水溶液
10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液（有關推薦的溶劑，請參閱我們的網站）。
2.在反應前幾分鐘以1：2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。 該溶液在冷凍時可穩定數周。
3.向炔烴改性的生物聚合物溶液中加入過量的染料疊氮化物（負載比：5-20染料疊氮化物/炔烴）。
4.加入5摩爾當量（參考染料疊氮化物）的THPTA / CuSO4。
5.加入10當量的抗壞血酸鈉（參見染料疊氮化物）。
6.在室溫下攪拌，渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。
7.通過凝膠過濾或透析純化您想要的分子。
標記細胞，細胞裂解物或生物樣品
1.準備以下試劑：
水性緩沖液或100mM THPTA配體水溶液
20mM CuSO4水溶液
300mM抗壞血酸鈉水溶液
2.5mM炔烴或疊氮化物標記試劑水溶液或DMSO溶液
2.對于每個疊氮化物或炔烴修飾的細胞或細胞裂解物樣品，將以下試劑加入1.5 mL微量離心管中，然后短暫渦旋混合。
50μL細胞或細胞裂解液樣品
50μLPBS緩沖液
50μL5mM相應的染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液（或染料炔烴）檢測試劑
3.加入10μL100mM THPTA溶液，短暫渦旋混合。
4.加入10μL20mM CuSO4溶液，短暫渦旋振蕩。
5.加入10μL300mM抗壞血酸鈉溶液以引發點擊反應，短暫渦旋混合。
6.保護點擊反應不受光照，使其在室溫下孵育30分鐘。
7.點擊標記細胞或細胞裂解物并準備用于下游處理和分析。
參考文獻
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153--0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011--E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425--E436
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