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iFluor 647疊氮化物

貨號1091存儲條件 在零下15度以下保存, 避免光照
規格1 mg價格2544
Ex (nm)656Em (nm)670
分子量1041.11溶劑DMSO
產品詳細介紹


簡要概述

iFluor 647疊氮化物是美國AAT Bioquest生產的用于標記蛋白/抗體的試劑,AAT Bioquest的iFluor 染料經過優化,可用于標記蛋白質,特別是抗體。 這些染料是明亮的,光穩定的并且對蛋白質具有最小的猝滅。 熒光儀器的主要激光線(例如,350,405,488,555和633nm)可以很好地激發它們。 iFluor 555染料的熒光激發和發射最大值分別為~550nm和~570nm。 iFluor 647系列的光譜特性基本上與Cy5®相同(Cy5®是GE Healthcare的商標)。 與Cy5探針相比,iFluor 647系列具有更強的熒光和更高的光穩定性。這些光譜特性使這種新染料系列成為Cy5®和AlexaFluor®647(Cy5®和AlexaFluor®是Invitrogen和GE Health Care的商標)的絕佳替代品。 iFluor 647疊氮化物相當穩定,對炔基具有良好的反應性和選擇性。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供最優質的iFluor 647疊氮化物檢測試劑。

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產品說明書

操作方案

標記寡核苷酸

1.準備以下試劑:

200mMTHPTA [tris(3-羥丙基三唑基甲基)胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烴修飾的低聚水溶液(盡可能濃縮,> 10 mg / mL)

100 mM抗壞血酸鈉水溶液

10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液(有關推薦的溶劑,請參閱我們的網站)

2.在反應前將CuSO4與THPTA以1:2的比例混合并充分渦旋幾分鐘。該溶液在冷凍時可穩定數周。

3.向炔烴改性的低聚物溶液中加入過量的染料疊氮化物(摩爾比為2-5當量)。

4.加入5當量的THPTA / CuSO4工作溶液(來自步驟1)。

5.加入10-30當量的抗壞血酸鈉。

6.在室溫下攪拌,渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。

7.乙醇通過所需方法(例如HPLC)沉淀或純化寡聚物。

 

標記肽

1.準備以下試劑:

200 mM THPTA配體水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烴修飾肽水溶液或DMF溶液(取決于您的肽溶解度,> 10 mg / mL)

100 mM抗壞血酸鈉水溶液

10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液(有關推薦的溶劑,請參閱我們的網站)

2.在反應前幾分鐘以1:2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。 該溶液在冷凍時可穩定數周。

3.向炔烴修飾的肽溶液中加入過量的染料疊氮化物(摩爾比為5-10當量)。

4.加入5-10當量的THPTA / CuSO4。

5.加入10-20當量的抗壞血酸鈉。

6.在室溫下攪拌,渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。

7.通過HPLC純化您想要的肽。

 

標記炔烴有機小分子

1.準備以下試劑:

200 mM THPTA配體水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烴化合物水溶液或DMF溶液(取決于您的化合物溶解度,> 10mg / mL,)

100 mM抗壞血酸鈉水溶液

10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液(有關推薦的溶劑,請參閱我們的網站)。

2.在反應前幾分鐘以1:2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。當冷凍時,該溶液可穩定數周。

3.向炔烴溶液中加入過量的染料疊氮化物(摩爾比為5-10當量)。

4.加入25當量的THPTA / CuSO4。

5.加入50當量的抗壞血酸鈉。

6.在室溫下攪拌反應混合物30-60分鐘。

7.通過色譜或其他方法純化您想要的分子。

 

標記生物聚合物

1.準備以下試劑:

200 mM THPTA配體水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烴改性的水中生物聚合物(盡可能濃縮,> 5毫克/毫升)

100 mM抗壞血酸鈉水溶液

10 mM染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液(有關推薦的溶劑,請參閱我們的網站)。

2.在反應前幾分鐘以1:2的比例孵育CuSO4與THPTA配體。 該溶液在冷凍時可穩定數周。

3.向炔烴改性的生物聚合物溶液中加入過量的染料疊氮化物(負載比:5-20染料疊氮化物/炔烴)。

4.加入5摩爾當量(參考染料疊氮化物)的THPTA / CuSO4。

5.加入10當量的抗壞血酸鈉(參見染料疊氮化物)。

6.在室溫下攪拌,渦旋或搖動反應混合物30-60分鐘。

7.通過凝膠過濾或透析純化您想要的分子。

 

標記細胞,細胞裂解物或生物樣品

1.準備以下試劑:

水性緩沖液或100mM THPTA配體水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗壞血酸鈉水溶液

2.5mM炔烴或疊氮化物標記試劑水溶液或DMSO溶液

2.對于每個疊氮化物或炔烴修飾的細胞或細胞裂解物樣品,將以下試劑加入1.5 mL微量離心管中,然后短暫渦旋混合。

50μL細胞或細胞裂解液樣品

50μLPBS緩沖液

50μL5mM相應的染料疊氮化物水溶液或DMSO溶液(或染料炔烴)檢測試劑

3.加入10μL100mM THPTA溶液,短暫渦旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液,短暫渦旋振蕩。

5.加入10μL300mM抗壞血酸鈉溶液以引發點擊反應,短暫渦旋混合。

6.保護點擊反應不受光照,使其在室溫下孵育30分鐘。

7.點擊標記細胞或細胞裂解物并準備用于下游處理和分析。

 

參考文獻

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153--0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011--E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425--E436

 

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產品名稱 貨號
iFluor 647琥珀酰亞胺酯 Cat#1031
iFluor 647馬來酰亞胺 Cat#1065
iFluor 647 胺 Cat#1074


說明書
iFluor 647疊氮化物.pdf


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